Asymmetrisches DiMethyl-Histon H4-R3 Kaninchen pAb | P62805 | Validiert für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA

Kern-Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H4

Histon H4 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, um die herum DNA gewickelt ist, um Chromatin zu bilden. Diese fundamentale Struktur verdichtet genomische DNA und reguliert ihre Zugänglichkeit für Enzyme und andere Faktoren, die für DNA-abhängige Prozesse wie Transkription, Replikation und Reparatur erforderlich sind. Histone, einschließlich H4, sind daher zentral für die Aufrechterhaltung der chromosomalen Stabilität und der epigenetischen Kontrolle.

Ein komplexer Satz posttranslationaler Modifikationen, oft als „Histone-Code“ bezeichnet, reguliert die Chromatindynamik. Histon H4 unterzieht sich zahlreichen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Citrullinierung, an verschiedenen Resten entlang seines N-terminalen Schwanzes und der globulären Domäne.

Dieser Antikörper zielt spezifisch auf die asymmetrische Dimethylierung von Arginin 3 (R3) im N-terminalen Schwanz von Histon H4 ab. Im verarbeiteten Protein entspricht dies dem Rest 4 (R4). Diese Modifikation wird hauptsächlich durch Protein-Arginin-Methyltransferase 1 (PRMT1) katalysiert und spielt eine Rolle bei der transkriptionellen Aktivierung und Chromatin-Remodellierung.

Verwandte Referenzen: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

Histon H4 ist im Zellkern und in den Chromosomen lokalisiert. Während der Spermatogenese ist die Acetylierung von H4 mit seiner nukleären Lokalisierung in Spermatiden des Stücks 11 assoziiert.

Verwandte Referenzen: UniProtKB P62805

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das eine asymmetrische Dimethylierung bei R3 trägt, und stellt eine hohe Spezifität für die methylierte Form von Histon H4 sicher. Erwägen Sie die Validierung der Spezifität durch den Vergleich von Signalen aus methylierten versus nicht-methylierten Peptid-Kompetitionsassays.
• Für Western Blot (WB) werden Histon-Extraktionsprotokolle empfohlen, die nukleäre oder chromatingebundene Proteine anreichern. Das vorhergesagte Molekulargewicht von Histon H4 beträgt ca. 11 kDa, obwohl es je nach Ausmaß anderer Modifikationen und Gelbedingungen etwas höher wandern oder als Bande erscheinen kann.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) und der Immunhistochemie (IHC-P) ist eine Kernfärbung zu erwarten. Die Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen müssen möglicherweise optimiert werden, um die Epitoperkennung zu erhalten und gleichzeitig den nukleären Kompartiment freizulegen.
• Bei der Verwendung dieses Antikörpers in ELISA sollte erwogen werden, mit methyliertem Peptid oder Histon-Extrakten zu beschichten, um die Bindungsaktivität zu screenen. Fügen Sie immer geeignete Kontrollen hinzu, um unspezifische Bindungen auszuschließen.
• Es wurde berichtet, dass dieser Antikörper H4 von Human, Maus und Ratte nachweist, wobei eine Vielzahl anderer Spezies vorhergesagt wird. Die Kreuzreaktivität sollte im relevanten Probensystem überprüft werden, wenn mit nicht-säugerischen Modellen gearbeitet wird.

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