Asymmetrisches DiMethyl-Histon H3-R8 Kaninchen pAb (Q16695 / P68431) – Validiert für WB, IHC-P, ChIP, ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3 (Asymmetrisches Dimethyl-R8)

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin umhüllt und kompaktiert, wodurch die Zugänglichkeit von DNA für zelluläre Maschinen eingeschränkt wird. Histone spielen eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird dynamisch durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen (PTMs), gemeinsam als Histon-Code bekannt, und durch Nukleosomen-Remodellierung reguliert. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Unter den zahlreichen PTMs auf Histon H3 wird die Argininmethylierung durch Protein-Arginin-Methyltransferasen (PRMTs) katalysiert und kann in asymmetrischer oder symmetrischer Form auftreten. Die asymmetrische Dimethylierung von H3R2 wird durch PRMT6 vermittelt PMID:17898714, während die asymmetrische Dimethylierung von H3R17 durch CARM1 katalysiert wird PMID:15345777. Der H3R8-Rest ist bekanntermaßen symmetrisch dimethyliert durch PRMT5; jedoch wurde asymmetrisches Dimethyl-H3R8 auch als spezifische epigenetische Markierung beschrieben. Dieser Antikörper zielt auf den asymmetrischen Dimethylierungszustand an Position R8 ab und ermöglicht die Unterscheidung dieser Modifikation.

Histon H3 ist im Zellkern und auf Chromatin lokalisiert. Die kanonische Isoform H3.1 (P68431) wird ubiquär exprimiert, während die Variante H3.1t (Q16695) spezifisch in Hodenexprimimiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:16567635 (Citrullinierung an R8/R2/R17)

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid mit asymmetrischer Dimethylierung an R8; es wird erwartet, dass der Antikörper diese Modifikation spezifisch erkennt. Aufgrund von Sequenzhomologie kann jedoch Kreuzreaktivität mit anderen methylierten Histon-H3-Varianten oder Positionen auftreten. Validieren Sie die Spezifität mittels Peptid-Konkurrenz, Knockout/Knockdown oder ortsgerichteter Mutagenese.
• Für Western Blot beträgt das erwartete Molekulargewicht ~15 kDa. Histone sind stark basisch; verwenden Sie Säure-Harnstoff-Gele oder schließen Sie geeignete Kontrollen ein, um modifizierte Formen aufzutrennen.
• Für ChIP beachten Sie, dass asymmetrisches Dimethyl-H3R8 spezifische Chromatinzustände markieren kann; optimieren Sie die Quervernetzungs- und Scherungsbedingungen.
• Die aufgelisteten Anwendungen umfassen WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA und ChIP. Verdünnungen müssen empirisch bestimmt werden, und alle Assays sollten geeignete Negativ- und Positivkontrollen enthalten.
• Kreuzreaktivität wird aufgrund der hohen Konservierung von Histon H3 für Mensch, Maus, Ratte und weitere Spezies vorhergesagt. Überprüfen Sie dies im entsprechenden Probensystem.

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