Asymmetrisches DiMethyl-Histon H4-R3 (P62805) Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H4

Histon H4 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, der Grundeinheit des Chromatins. Zusammen mit den Histonen H2A, H2B und H3 bildet es ein Oktamer, um das DNA gewickelt ist, komprimiert das Genom und reguliert den Zugang zum genetischen Material. Diese strukturelle Rolle ist essenziell für die Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomale Stabilität. Die Funktionen von Histonen werden durch ein komplexes Gefüge posttranslationaler Modifikationen (PTMs) reguliert, das gemeinsam als "Histon-Code" bezeichnet wird und die Chromatin-Dynamik und Proteininteraktionen verändert.

Asymmetrische Dimethylierung von Histon H4 an Arginin 3 (H4R3me2a) ist eine spezifische PTM, die durch Protein-Arginin-Methyltransferase 1 (PRMT1) katalysiert wird. Diese Modifikation tritt am flexiblen N-terminalen Schwanz von H4 auf und wird mit transkriptioneller Aktivierung und epigenetischer Regulation in Verbindung gebracht. Die Modifikation schafft eine Andockstelle für Effektorproteine, die die Methylierungsmarke interpretieren und dadurch Genexpressionsmuster beeinflussen.

Verwandte Referenzen: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

Histon H4 ist überwiegend im Zellkern lokalisiert und während des gesamten Zellzyklus mit Chromosomen assoziiert. Seine hochkonservierte Sequenz über Eukaryoten hinweg unterstreicht seine grundlegende biologische Bedeutung. Neben der asymmetrischen Dimethylierung erfährt der N-terminale Schwanz von H4 viele weitere Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung und symmetrische Dimethylierung, die gemeinsam die Chromatinfunktion orchestrieren.

Dieser Antikörper erkennt spezifisch die asymmetrische Dimethylierungsmarke an R3 und ermöglicht die detaillierte Untersuchung dieser epigenetischen Modifikation in verschiedenen biologischen Kontexten.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die asymmetrische Dimethyl-R3-Modifikation trägt. Zur Bestätigung der Antikörperspezifität sollten Sie Peptid-Konkurrenzassays mit sowohl methylierten als auch nicht methylierten Peptiden durchführen.
• Für Western Blotting wird ein Standard-Protokoll zur Histon-Extraktion empfohlen, um chromatidgebundene Proteine anzureichern. Das vorhergesagte Molekulargewicht von Histon H4 beträgt ~11 kDa. Führen Sie SDS-PAGE unter geeigneten Bedingungen durch (z. B. 15 %-Gel) für eine optimale Auflösung von niedermolekularen Histonen.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) kann eine Antigen-Retrieval notwendig sein. Optimieren Sie die Retrieval-Methode und die Antikörperverdünnung mit geeigneten positiven und negativen Gewebekontrollen.
• Für diesen Antikörper wird eine Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus, Ratte und weiteren Spezies vorhergesagt. Dennoch sollte die Kreuzreaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System mit verfügbaren Kontrollen überprüft werden.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargenkonsistenz für kritische quantitative Assays überprüft werden. Erwägen Sie die Verwendung eines Ladungskontrolls wie gesamtes Histon H4 oder eines Housekeeping-Proteins.

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