Asymmetrisches DiMethyl-Histon H3 (R17) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper – Q16695/P68431 | WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, welches die DNA wickelt und zu Chromatin verdichtet. Diese Verpackung begrenzt die Zugänglichkeit der DNA für die zellulären Maschinerien, die für Prozesse wie Transkription, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomale Stabilität erforderlich sind. Histone spielen daher eine zentrale Rolle bei der Regulation der Genexpression und der Integrität des Genoms. Verwandte Referenzen: UniProtKB Q16695 / P68431

Die Funktion von Histonen wird stark durch eine Vielzahl von posttranslationalen Modifikationen (PTMs) reguliert, oft als „Histone-Code“ bezeichnet. Diese PTMs umfassen unter anderem Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung; sie orchestrieren das Nukleosom-Remodeling und die Rekrutierung von Effektorproteinen. Unter diesen Modifikationen ist die Argininmethylierung – insbesondere die asymmetrische Dimethylierung – ein wichtiges epigenetisches Merkmal, das mit transkriptioneller Aktivierung und Silenzierung assoziiert ist.

Histon H3 existiert in mehreren Isoformen. Das replikationsabhängige H3.1 (P68431) wird breit in Geweben exprimiert, während H3.1t (Q16695) spezifisch in Hodenzellen exprimiert wird, was auf spezialisierte Rollen bei der Spermatogenese hindeutet. Beide Isoformen lokalisieren zum Zellkern und zu den Chromosomen.

Die asymmetrische Dimethylierung von Histon H3 an Arginin 17 (R17; Position 18 in der Vorläufersequenz einschließlich der initiatorischen Methionin) wird durch die Protein-Arginin-Methyltransferase CARM1 (PRMT4) katalysiert. Diese Modifikation wurde mit der Transkriptionsregulation in Verbindung gebracht und ist ein gut untersuchter Marker für aktive Chromatinzustände. Verwandte Referenzen: PMID:15345777, PMID:15471871, PMID:16497732

Dieser Antikörper erkennt spezifisch Histon H3, wenn es an R17 asymmetrisch dimethyliert ist. Er detektiert nicht unmodifiziertes H3 oder andere Methylierungszustände wie symmetrisch dimethyliertes oder monomethyliertes Arginin an dieser Stelle, was ihn zu einem wertvollen Werkzeug für die Untersuchung der CARM1-vermittelten Signalgebung und epigenetischen Regulation macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das rund um das asymmetrisch dimethylierte Arginin an R17 von menschlichem Histon H3 entworfen wurde. Führen Sie ein Western Blotting (WB) oder eine Immunhistochemie (IHC-P) durch, sollten Sie Zell- oder Gewebelysate, die bekannt für die Expression dieser Modifikation sind (z. B. HeLa-Zellen oder Maus-Hoden), als positive Kontrollen in Betracht ziehen.
• Da vorhergesagt wird, dass dieser Antikörper über eine breite Kreuzreaktivität über Mensch, Maus und Ratte hinaus verfügt, eignet er sich möglicherweise zum Nachweis der Modifikation in anderen Spezies. Es wird jedoch eine Validierung im entsprechenden Probenystem empfohlen.
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass das Beschichtungsantigen das asymmetrisch dimethylierte R17-Epitop enthält, da der Antikörper unmodifizierte oder anders methylierte Peptide nicht erkennen wird.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, ist eine Chargen-zu-Chargen-Variabilität zu berücksichtigen; fügen Sie geeignete negative Kontrollen (z. B. unmodifiziertes H3-Peptid) hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.

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