Asymmetrische DiMethyl-Histon H3-R2 Kaninchen polyklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB und ELISA

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3

• Histon H3 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, essenziell für die Kompaktierung von DNA zu Chromatin und die Regulation von Genexpression, DNA-Reparatur, Replikation und chromosomaler Stabilität. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431.
• Posttranslationale Modifikationen von Histon H3, insbesondere an seinem N-terminalen Schwanz, bilden einen „Histon-Code“, der die Chromatindynamik steuert. Die asymmetrische Dimethylierung an Arginin 2 (H3R2me2a) wird durch die Protein-Arginin-Methyltransferase 6 (PRMT6) katalysiert. Diese Modifikation ist an der Transkriptionsregulation und Chromatinstruktur beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:18079182.
• Histon H3 lokalisiert im Zellkern und assoziiert während des gesamten Zellzyklus mit Chromosomen.
• Es werden zwei Hauptvarianten unterschieden: das replikationsabhängige H3.1 (kodiert von Genen wie HIST1H3A, P68431) und das hodenspezifische H3.1t (H3-4, Q16695), das in Hodenzellen exprimiert wird.
• Das Immunogen entspricht einem Peptid mit asymmetrischer Dimethylierung am ersten Arginin nach Abspaltung der Initiator-Methionin (Position 3 im Volllängenprotein), was eine spezifische Erkennung der H3R2me2a-Markierung gewährleistet.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Bestätigen Sie die Antikörperspezifität durch die Verwendung von nicht methylierten oder symmetrisch dimethylierten Peptid-Kompetitoren in Ihrem Assay.
• Für Western Blot (WB) zeigen Gesamtzelllysate typischerweise eine Bande bei etwa 15 kDa. Optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers und berücksichtigen Sie Ladekontrollen wie Gesamt-H3- oder Pan-Histon-H3-Antikörper.
• Verwenden Sie im ELISA das immunisierende Peptid als Positivkontrolle und testen Sie gegen Peptide mit unterschiedlichen Modifikationen, um die Selektivität zu bestätigen.
• Aufgrund der hohen Sequenzkonservierung von Histon H3 wird eine Kreuzreaktivität mit vielen Spezies vorhergesagt; validieren Sie jedoch die Reaktivität in Ihrem spezifischen Probensystem.

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