Anti-Histon H4 Kaninchen-PolymAb® für WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA – P62805

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H4

• Histon H4 ist eines der vier Kern-Histonproteine (H2A, H2B, H3, H4), die das Nukleosomen-Octamer bilden, das etwa 147 bp DNA einhüllt und das Genom zu Chromatin kompaktiert.
• Als Komponente des Nukleosomenkerns spielt H4 eine zentrale Rolle bei der Regulation der DNA-Zugänglichkeit für Transkription, Replikation und Reparatur sowie bei der Erhaltung der chromosomalen Stabilität.
• Beim Menschen wird H4 von 14 nahezu identischen Genen (H4C1–H4C16) kodiert, die an mehreren chromosomalen Loci clustern und ein konserviertes Protein aus 103 Aminosäuren produzieren.
• H4 kommt ausschließlich im Zellkern und an Chromosomen vor, wo es umfangreichen posttranslationalen Modifikationen unterliegt (Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung, Ubiquitinierung etc.). Diese bilden den sogenannten "Histon-Code", der die Chromatin-Dynamik steuert.
• Modifikationen am N-terminalen Ende (Aminosäuren 1–20) sind für die Genregulation entscheidend; beispielsweise korreliert die Acetylierung spezifischer Lysine mit aktiver Transkription, während Methylierung je nach Position entweder Aktivierung oder Repression signalisieren kann.
• Störungen von H4-Genen oder regulatorischen Markierungen sind mit Krankheiten verbunden; seltene Mutationen führen zu neurologischen Entwicklungsphänotypen einschließlich geistiger Behinderung, was die essentielle Bedeutung von Histon H4 für die Entwicklung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen zielt auf die Aminosäuren 1–100 ab und umfasst das N-terminale Ende sowie die globuläre Domäne; beachten Sie, dass die Erkennung des N-terminalen Epitops in manchen Chromatinkontexten durch dichte posttranslationale Modifikationen beeinträchtigt werden kann.
• Für den Western Blot (WB) ist eine starke Bande bei ~11 kDa zu erwarten; verwenden Sie säureextrahierte Histonproben als Positivkontrolle, um basische Proteine anzureichern.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) kann die Kompaktierung von Chromatin in heterochromatischen Regionen das Epitop maskieren; schonende DNAse-Verdauung oder milde Permeabilisierungsprotokolle können die Detektion verbessern.
• Für die Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) validieren Sie die Fähigkeit des Antikörpers, modifizierte im Vergleich zu unmodifizierten Nukleosomen unter quervernetzenden und nativen Bedingungen anzureichern, da die Epitopzugänglichkeit je nach Chromatinkompaktierung variiert.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist aufgrund der hohen Sequenzkonservierung zu erwarten (Humanes/Maus-H4 ist identisch); bestätigen Sie jedoch immer die Spezifität für die jeweilige Art und Anwendung.

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