DiMethyl-Histone H3-K9 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für epigenetische Forschung | WB, ChIP, IF/ICC

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das die DNA verpackt und zu Chromatin verdichtet, wodurch die Zugänglichkeit der DNA für Prozesse wie Transkription, DNA-Reparatur, Replikation und chromosomale Stabilität reguliert wird. Die dynamische posttranslationale Modifikation von Histonen, einschließlich Methylierung, Acetylierung und Phosphorylierung, bildet den „Histone-Code“, der die Struktur und Funktion des Chromatins steuert.

Die Methylierung an Lysin 9 von Histon H3 (H3K9; entspricht Position 10 im UniProt-Eintrag P68431 unter Einbeziehung der initiatorischen Methionin) ist ein kritischer epigenetischer Marker. Die Dimethylierung an dieser Stelle (H3K9me2) wird durch verschiedene Methyltransferasen katalysiert und ist im Allgemeinen mit der transkriptionellen Repression und der Bildung von Heterochromatin assoziiert. Sowohl das kanonische Histon H3.1 (P68431) als auch die testisspezifische H3.1t-Variante (Q16695) enthalten dieses Lysinrest, der verschiedenen Arten von Modifikationen unterliegt, einschließlich Di- und Trimethylierung. Verwandte Referenzen: PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050

Histon H3 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert und ist eine strukturelle Komponente der Chromosomen. Während H3.1 ubiquitär in replizierenden Zellen exprimiert wird, zeigt H3.1t Gewebsspezifität und findet sich vorwiegend in Hodenzellen, was seine Rolle bei der Chromatinorganisation während der Spermatogenese widerspiegelt. Verwandte Referenzen: PMID:16567635

Die immunglobulinartige Faltung von Histon H3 zusammen mit anderen Kernhistonen erleichtert die Bildung des Nukleosomkernpartikels und bietet eine stabile Plattform für die höherwertige Chromatinmontage. Die Muster der posttranslationalen Modifikationen an H3, einschließlich Dimethylierung an K9, werden während des Zellzyklus und der Entwicklung dynamisch reguliert und beeinflussen die Genexpressionsprofile.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von menschlichem Histon H3 abdeckt. Bei Verwendung des Antikörpers in Anwendungen wie Western Blotting (WB) oder Immunhistochemie (IHC) sollten Sie die Spezifität durch Peptid-Wettbewerbsassays oder durch die Verwendung gut charakterisierter positiver und negativer Kontrollproben überprüfen.
• Für Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) und ChIP-seq kann die Reaktivität des Antikörpers mit dimethyliertem H3K9 (H3K9me2) genutzt werden, um repressive Chromatindomänen zu kartieren. Stellen Sie sicher, dass die Vernetzungs- und Sonikationsbedingungen für Ihren Zelltyp optimiert sind.
• Im WB beträgt das erwartete Molekulargewicht von Histon H3 ca. 15 kDa. Ein klares Band dieser Größe sollte beobachtet werden; zusätzliche Bänder können auf unspezifische Bindung hindeuten, daher wird eine Optimierung der Verdünnung empfohlen.
• Dieser Antikörper hat aufgrund der Sequenzkonservierung eine breite Kreuzreaktivität vorhergesagt, aber wir empfehlen, die Reaktivität in Ihrer spezifischen Art und Ihrem Probentyp zu validieren, insbesondere bei nicht-säugetierischen Organismen.

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