Symmetrisches DiMethyl-Histon H3-R8 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB, ELISA, ChIP

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H3-Funktion und Lokalisierung

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, das DNA zu Chromatin verpackt und dadurch die Zugänglichkeit der DNA für zelluläre Maschinerien einschränkt. Histone spielen eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird über einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen (PTMs) der Histone reguliert, auch bekannt als Histon-Code, sowie über Nukleosomen-Remodellierung. Verwandte Referenzen: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

Das kanonische Histon H3.1 (kodiert durch multiple Gene wie HIST1H3A-J) wird ubiquitär exprimiert, während die testisspezifische H3.1t-Variante (kodiert von H3-4/HIST3H3) hauptsächlich in testikulären Zellen vorkommt. Dieser Antikörper zielt auf die symmetrische Dimethylierung an Arginin 8 (R8) von Histon H3 ab, eine Modifikation, die durch die Protein-Arginin-Methyltransferase 5 (PRMT5) katalysiert wird. Die symmetrische Dimethylierung an H3R8 wird mit transkriptioneller Repression und Chromatin-Remodellierung in Verbindung gebracht und trägt zur dynamischen Regulation der Genexpression bei. Verwandte Referenzen: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

Die Modifikation findet im N-terminalen Schwanz von Histon H3 statt, einer Region, die reich an regulatorischen PTMs ist, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und anderen. Das Zusammenspiel dieser Markierungen steuert Chromatinstruktur und -funktion, wodurch ortsspezifische Antikörper wie dieser Anti-symmetrisch-dimethyl-H3R8 für die epigenetische Forschung unverzichtbar sind. Verwandte Referenzen: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches symmetrisch dimethyliertes Peptid um R8 von humanem Histon H3, das entwickelt wurde, um die symmetrische Dimethylierungsmarkierung spezifisch zu erkennen. Bei der Verwendung dieses Antikörpers im Western Blot (WB) ist zu beachten, dass das vorhergesagte Molekulargewicht von Histon H3 etwa 15 kDa beträgt. Stellen Sie eine vollständige Kernextraktion für eine optimale Detektion sicher.
• Für ELISA kann die direkte Beschichtung mit dem synthetischen Peptid oder Nukleosomenextrakten verwendet werden, um die Antikörperbindung zu validieren. Schließen Sie immer geeignete Kontrollpeptide (nicht-modifiziert, asymmetrisch dimethyliert oder andere Methylierungszustände) ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei der Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) kann dieser Antikörper für die Anreicherung von genomischen Regionen geeignet sein, die mit symmetrisch dimethyliertem H3R8 assoziiert sind. Vernetzungs- und Sonikationsbedingungen sollten für Ihren spezifischen Zelltyp und Zielorte optimiert werden.
• Aufgrund der vorhergesagten breiten Kreuzreaktivität (human, Maus, Ratte und andere) ist es ratsam, den Antikörper im relevanten Proben-System zu validieren, bevor groß angelegte Experimente durchgeführt werden. Spezies-spezifische Sequenzvariationen in der Nähe von R8 könnten die Bindungsaffinität beeinflussen; konsultieren Sie die spezifische Histon H3-Sequenz für Ihren Organismus von Interesse.
• Wie bei jedem modifikationsspezifischen Antikörper kann es von Charge zu Charge zu Schwankungen kommen. Titrieren Sie den Antikörper immer, um die optimale Arbeitsverdünnung für Ihren spezifischen Assay zu bestimmen.

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