Asymmetrisches DiMethyl-Histon H3-R8 Kaninchen mAb (Q16695/P68431) für epigenetische Forschung

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3

Histon H3 ist ein Kernbestandteil des Nukleosoms, das DNA verpackt und zu Chromatin kompaktiert, um die Zugänglichkeit für Transkription, Replikation und Reparatur zu begrenzen. Durch eine komplexe Vielfalt posttranslationaler Modifikationen (PTMs) spielen Histone eine zentrale Rolle bei der Regulation der Genexpression, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität – ein Phänomen, das oft als Histon-Code bezeichnet wird.

Die asymmetrische Dimethylierung von Argininresten (Rme2a) an Histonschwänzen, einschließlich an R8 von Histon H3, wird durch Protein-Arginin-Methyltransferasen (PRMTs) katalysiert und trägt je nach genomischem Kontext zur transkriptionellen Aktivierung oder Stilllegung bei. Diese spezifische Modifikation ist Teil einer breiteren epigenetischen Landschaft, die die Chromatindynamik steuert.

Dieser Antikörper zielt auf zwei Hauptvarianten von Histon H3 ab: Histon H3.1t (kodiert durch H3-4/HIST3H3, UniProt Q16695) und das kanonische Histon H3.1 (kodiert durch mehrere H3C-Gene, UniProt P68431). Während Histon H3.1 weit verbreitet exprimiert wird, zeigt Histon H3.1t eine testisspezifische Expression. Beide Varianten lokalisieren sich im Zellkern und auf Chromosomen.

Verwandte Referenzen: UniProt:Q16695, UniProt:P68431

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Western Blot (WB): Es ist eine einzelne Bande um 15 kDa zu erwarten. Verwenden Sie KernExtrakte oder säureextrahierte Histone als Positivkontrolle. Erwägen Sie die Einbeziehung einer Konkurrenz durch unmodifizierte Peptide, um die Spezifität für die asymmetrische Dimethyl-R8-Modifikation zu bestätigen.
• Dot Blot (DB): Auftragen von Peptidantigenen (asymmetrisches Dimethyl-R8 vs. unmodifiziertes oder symmetrisches Dimethyl-R8) zur Beurteilung der Antikörperspezifität.
• Immunhistochemie (IHC-P): Eine Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6,0) wird empfohlen. Validieren Sie das Signal in Geweben, von denen bekannt ist, dass sie H3R8me2a exprimieren, und verwenden Sie Isotypkontrollen, um die Spezifität der Färbung zu bestätigen.
• ELISA: Geeignet für sowohl direkte als auch Sandwich-ELISA-Formate. Optimieren Sie die Beschichtungskonzentrationen mit dem Immunogenpeptid.
• Alle Verdünnungen und Bedingungen müssen empirisch für das jeweilige experimentelle System bestimmt werden.

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