Anti-PARP1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA – P09874

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PARP1

• PARP1 ist eine Poly-ADP-Ribosyltransferase, die die PARylierung von Proteinen vermittelt, hauptsächlich an Serinresten, und spielt eine Schlüsselrolle bei der DNA-Reparatur. Verwandte Referenzen: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Es initiiert die Reparatur von DNA-Brüchen, indem es DNA-Brüchen im Chromatin erkennt und an sie bindet, HPF1 rekrutiert und die Histon-PARylierung katalysiert (z. B. H2BS6ADPr, H3S10ADPr), um das Chromatin zu dekompaktieren und den Zugang für Reparaturfaktoren zu erleichtern. Verwandte Referenzen: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625
• PARP1 akkumuliert zusammen mit TIMELESS an DNA-Schadensstellen und fördert die homologe Rekombinationsreparatur von Doppelstrangbrüchen durch Vermittlung der Poly-ADP-Ribosylierung. Verwandte Referenzen: PMID:26344098, PMID:30356214
• PARP1 istleär lokalisiert (Chromatin, Nukleolus) und transloziert nach DNA-Schäden oder Apoptose dynamisch ins Zytoplasma, wo es Prozesse wie die Hemmung des cGAS-STING-Signalwegs und die AIFM1-vermittelte Apoptose reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:35460603, PMID:33168626
• PARP1 moduliert die Transkription durch Bindung an Nukleosomen und Veränderung der Chromatinstruktur wie bei Histon H1, wobei es sowohl als Repressor als auch als kontextabhängiger Regulator der Elongation der RNA-Polymerase II wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• Während der Apoptose wird PARP1 durch Caspase-3/7 gespalten, wodurch Fragmente entstehen, die ins Zytoplasma translozieren, eine auto-Poly-ADP-Ribosylierung durchlaufen und als pro-apoptotischer Poly-ADP-Ribose-Träger dienen, um den AIFM1-vermittelten Zelltod zu induzieren. Verwandte Referenzen: PMID:33168626

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid entsprechend der Aminosäuren 700–800 von humanem PARP1 (P09874). Diese Region liegt innerhalb der katalytischen Domäne, was zur Spezifität des Antikörpers für full-längiges PARP1 beitragen kann.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC und IF-P) empfehlen sich geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle sowie die Verwendung bekannter positiver und negativer Kontrollzelllinien oder Gewebe.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) sollten Antigen-Retrieval-Bedingungen und Antikörperverdünnung empirisch optimiert werden; verwenden Sie menschliches, murines oder Rattengewebe mit nachgewiesener PARP1-Expression als Positivkontrolle.
• Bei ELISA kann die Kombination mit einem geeigneten Nachweisantikörper die Sensitivität erhöhen; validieren Sie den Assay mit rekombinantem PARP1-Protein oder Zelllysaten.
• Aufgrund des großen Molekulargewichts (113 kDa) stellen Sie sicher, dass Sie optimale Bedingungen für den Proteintransfer verwenden, wenn Sie Western Blotting als orthogonale Methode einsetzen.

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