Anti-p53 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IP, ELISA - P04637

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p53-Funktion und -Lokalisierung

• p53, auch bekannt als zelluläres Tumorantigen p53, Phosphoprotein p53 und Tumorsuppressor p53, wird vom TP53-Gen kodiert. Es existieren mehrere Isoformen (z. B. verstärkt Isoform 2 die Transaktivierungsaktivität, unterdrückt Isoform 4 die Transaktivierung, hemmt Isoform 7 die Apoptose) mit unterschiedlichen funktionellen Eigenschaften.
• Wirkt als multifunktioneller Transkriptionsfaktor, der nach Bindung an seine Ziel-DNA-Sequenz einen Zellzyklusarrest, die DNA-Reparatur oder Apoptose induziert und in vielen Tumortypen als Tumorsuppressor fungiert.
  Verwandte Referenzen: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Die Induktion der Apoptose wird teilweise durch die Stimulation der Expression von BAX und FAS-Antigen oder durch die Repression der Bcl‑2-Expression vermittelt; ihre pro‑apoptotische Aktivität wird durch Wechselwirkungen mit Proteinen der ASPP-Familie reguliert.
  Verwandte Referenzen: PMID:12524540, PMID:17189187
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, das Zytoplasma, die Mitochondrien, das endoplasmatische Retikulum und das Zentrosom, was ein dynamisches Shuttling als Reaktion auf zelluläre Stresssignale ermöglicht.
• Unterliegt umfangreichen post‑translationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität und transkriptionelle Aktivität modulieren.
• Reguliert die zirkadiane Uhr durch Repression der CLOCK‑BMAL1‑vermittelten transkriptionellen Aktivierung von PER2.
  Verwandte Referenzen: PMID:24051492
• Wird ubiquitär in normalen Geweben exprimiert mit isoformabhängigen Mustern; beispielsweise fehlt Isoform 2 im Gehirn, in der Lunge und in der Prostata, während Isoform 8 nur im Dickdarm, im Knochenmark, im Hoden, im fetalen Gehirn und im Darm nachgewiesen wird.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus einem rekombinanten Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1–393 von humanem p53 (NP_000537.3) abdeckt und fast die Volllängensequenz umfasst; dieses Design kann die Erkennung von Epitopen über mehrere funktionelle Domänen hinweg ermöglichen und eignet sich für Anwendungen wie Western Blotting, Immunpräzipitation und ELISA.
• Als KO‑validierter monoklonaler Antikörper wird erwartet, dass er eine hohe Spezifität aufweist; erwägen Sie die Verwendung eines p53-Knockout-Zelllysats als Negativkontrolle im Western Blot, um die Identität der Zielbande zu bestätigen.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 44 kDa, aber post‑translationale Modifikationen und Isoformvariationen können zu mehreren Banden oder einer leichten Verschiebung führen; optimieren Sie entsprechend die Ladungsmengen und Belichtungszeiten.
• Für die Immunpräzipitation verwenden Sie standardisierte Protokolle und schließen Sie einen Isotyp-Kontrollantikörper ein, um unspezifische Bindungen zu bewerten.
• Im ELISA kombinieren Sie diesen Antikörper mit einem geeigneten Detektionsantikörper nach Standardverfahren; validieren Sie in der relevanten Probenmatrix, um die Leistung sicherzustellen.

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