Anti-PARP1 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09874

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PARP1

• PARP1 ist ein nukleäres Enzym, das die Poly(ADP-Ribosylierung) von Zielproteinen katalysiert und eine zentrale Rolle bei der DNA-Reparatur, der Genomerhaltung und dem Zelltod spielt. Verwandte Referenzen: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Als DNA-Schadenssensor bindet PARP1 an einzel- und doppelsträngige Brüche und katalysiert zusammen mit HPF1 die Serin-ADP-Ribosylierung von Histonen und anderen Chromatinproteinen, um die Chromatinrelaxation und Rekrutierung von Reparaturfaktoren zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:28190768, PMID:29954836
• PARP1 kann auch Glutamat/Aspartat-ADP-Ribosylierung über die Interaktion mit NMNAT1 und Tyrosin-ADP-Ribosylierung mit HPF1 vermitteln, was eine kofaktorabhängige Restspezifität zeigt. Verwandte Referenzen: PMID:25043379, PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:30257210
• Über die Reparatur hinaus fungiert PARP1 als Transkriptionsregulator, der sowohl als Repressor (durch Modifikation der Chromatinstruktur) als auch als positiver oder negativer Elongationsfaktor je nach Kontext wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• PARP1 ist an programmierten Zelltodwegen beteiligt: sein vollständiges Protein ist am Parthanatos beteiligt, während die caspaseabhängige Spaltung ein 89-kDa-Fragment erzeugt, das die AIFM1-vermittelte Apoptose fördert. Verwandte Referenzen: PMID:33168626
• Subzellulär lokalisiert sich PARP1 hauptsächlich im Zellkern und Nukleolus, kann aber ins Zytoplasma translozieren oder an Chromosomen binden, insbesondere bei DNA-Schäden oder Apoptose.
• PARP1 enthält mehrere Zinkfingerdomänen für die DNA-Bindung und eine katalytische Domäne; seine Aktivität wird durch posttranslationelle Modifikationen einschließlich Auto-ADP-Ribosylierung, Acetylierung und Phosphorylierung reguliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen katalytischen Domäne (AS 662-1014). Daher kann der Antikörper im Western Blot sowohl die volle Länge von PARP1 (~113 kDa) als auch das durch Caspase gespaltene C-terminale Fragment (~89 kDa) erkennen. Für Apoptosestudien sollten Sie geeignete Induktoren verwenden und die Spaltungsmuster validieren.
• Bei IHC-P ist überwiegend nukleäre Färbung zu erwarten; je nach Zellzustand oder Gewebeaufarbeitung können jedoch zytoplasmatische oder nukleolare Signale auftreten. Fügen Sie immer Positivkontrollen (z. B. proliferierende Zellen) und Negativkontrollen hinzu.
• Für IF/ICC sollten Permeabilisierungs- und Fixierungsprotokolle optimiert werden, da PARP1 fest an Chromatin gebunden ist. Triton X-100 oder Methanolfixierung kann hilfreich sein.
• Bei ELISA-Anwendungen kann eine Antikörper-Titration erforderlich sein; rekombinante Antigene oder Zelllysat-Antigene können verwendet werden.

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