Anti-PARP1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF, IHC, ELISA - P09874

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PARP1-Funktion und -Lokalisierung

• PARP1 fungiert als Poly-ADP-Ribosyltransferase und katalysiert die Übertragung von ADP-Ribose-Einheiten von NAD+ auf Zielproteine. Diese Aktivität ist zentral für die DNA-Schadensreparatur und die Aufrechterhaltung der genomischen Integrität. Verwandte Referenzen: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500

• Bei Erkennung von DNA-Strangbrüchen rekrutiert PARP1 HPF1, um die Serin-ADP-Ribosylierung von Histonen (z.B. H2B an Ser6, H3 an Ser10) zu initiieren, was zur Chromatin-Dekompaktion und zum Zusammenbau von Reparaturkomplexen führt. Verwandte Referenzen: PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:17177976

• PARP1 ist an sowohl der Basenexzisionsreparatur (BER) als auch der Doppelstrangbruchreparatur (DSBR) beteiligt. Es kooperiert mit TIMELESS, um die homologe Rekombination durch Poly-ADP-Ribosylierung von Reparaturfaktoren zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:26344098, PMID:30356214

• Über die DNA-Reparatur hinaus reguliert PARP1 die Transkription, indem es an Nukleosomen bindet und die Chromatinarchitektur auf ähnliche Weise wie Histon H1 verändert, wodurch die RNA-Polymerase-II-Aktivität reprimiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:15607977, PMID:22464733

• PARP1 ist ein kritischer Mediator des programmierten Zelltods. Sein Caspase-3/7-Spaltprodukt translokiert ins Zytoplasma und trägt Poly-ADP-Ribose-Ketten, die die AIFM1-abhängige Apoptose auslösen. Verwandte Referenzen: PMID:33168626

• Subzellulär befindet sich PARP1 vorwiegend im Zellkern, Nukleolus und auf Chromosomen. Nach Phosphorylierung durch PRKDC kann es ins Zytoplasma shutteln, wo es angeborene Immunwege, wie den cGAS-STING-Weg, moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:35460603

• PARP1 katalysiert seine eigene Auto-Poly-ADP-Ribosylierung, eine wichtige regulatorische Modifikation, die seine Aktivität, Proteininteraktionen und Rekrutierung zu DNA-Läsionen kontrolliert. Verwandte Referenzen: PMID:17396150, PMID:19764761, PMID:24906880

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen liegt innerhalb der Aminosäuren 200–300 von humanem PARP1, einer Region, die den zweiten Zinkfinger und einen Teil der BRCT-Domäne enthält. Der resultierende Kaninchen-monoklonale Antikörper erkennt voraussichtlich ein Epitop, das über die aufgeführten reaktiven Spezies (Human, Maus, Ratte) hinweg konserviert ist.
• Für Western Blot (WB) sollte ein vorherrschendes Band bei etwa 113 kDa detektiert werden. Ziehen Sie die Verwendung von Kernextrakten als Probenquelle in Betracht und validieren Sie die Spezifität durch siRNA-vermittelten Knockdown von PARP1.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) sind nukleäre oder chromosomale Färbemuster zu erwarten. Da paraffineingebettete Schnitte eine Antigen-Demaskierung erfordern können, optimieren Sie Citrat- oder EDTA-basierte hitzeinduzierte Epitop-Demaskierungsprotokolle für Ihr Gewebe.
• Der Antikörper wird für ELISA-Anwendungen angegeben. Für Sandwich-ELISA wird die Paarung mit einem zweiten Klon, der ein anderes Epitop erkennt, empfohlen; internes paarweises Screening kann optimale Capture/Detektions-Kombinationen identifizieren.
• Da PARP1 umfangreichen posttranslationalen Modifikationen und Spaltungen unterliegt, berücksichtigen Sie den biologischen Kontext (z.B. DNA-Schadensinduktion, Apoptose) bei der Interpretation der Ergebnisse. Vollständige und gespaltene Formen können je nach Behandlungsbedingungen koexistieren.

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