Anti-PKC-zeta-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q05513

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PKC zeta

• PKC zeta (nPKC-zeta) ist eine atypische Proteinkinase C, die keine Empfindlichkeit gegenüber Calcium und Diacylglycerol aufweist und als Serin/Threonin-Proteinkinase bei der NF-kappa-B-Aktivierung, mitogenen Signalgebung, Zellproliferation, Zellpolarität, Entzündungsreaktion und Erhaltung der Langzeitpotenzierung (LTP) fungiert.
• Downstream von PI3K aktiviert PKC zeta die MEK1-ERK2-Kaskade unabhängig von RAF1 in Makrophagen und nach mitogenen Stimuli. Es trägt außerdem zur insulinabhängigen AKT3-Aktivierung und GLUT4-Translokation in Adipozyten bei, wobei es teilweise als Adapter wirkt.
• PKC zeta vermittelt die NF-kappa-B-Aktivierung durch Wechselwirkungen mit SQSTM1/p62, RIPK1 und TRAF6, was zur IKBKB-Phosphorylierung und zum Abbau des NF-kappa-B-Inhibitors führt. Es phosphoryliert RELA zusätzlich an Ser-311, um der SETD6-vermittelten Repression entgegenzuwirken.
• Bei der Zellpolarität bildet PKC zeta einen zytoplasmatischen Komplex mit PARD6A und wird durch CDC42 rekrutiert, um mit Mikrotubulus-Motoren Polarität zu etablieren. Es stimuliert die neuronale Differenzierung zusammen mit FEZ1 und wird für die späte Phase der LTP in hippocampalen CA1-Synapsen benötigt, die für das Langzeitgedächtnis entscheidend ist.
• PKC zeta phosphoryliert VAMP2 in vitro und aktiviert LRRK1, das anschließend an der intrazellulären Traffizierung beteiligte RAB-Proteine phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:17313651 PMID:36040231
• PKC zeta lokalisiert sich im Zytoplasma, an Endosomen, Zellverbindungen und der Membran. Es wird überwiegend im Gehirn exprimiert, mit geringeren Gehalten in Lunge, Niere und Hoden. Es enthält eine Zinkfingerdomäne und eine ATP-Bindungsstelle und unterliegt alternativem Spleißen und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Aminosäuren 476–547), was eine gute Epitopzugänglichkeit für den Nachweis von nativem und denaturiertem Protein bieten kann.
• Für das Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~68 kDa; fügen Sie immer Positiv- und Negativkontrollen hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, da PKC zeta in mehreren Kompartimenten (Zytoplasma, Membran, Endosomen, Verbindungen) lokalisiert sein kann.
• ELISA kann zur quantitativen Bestimmung von PKC zeta in Zelllysaten oder gereinigtem Protein verwendet werden; validieren Sie mit bekannten Standards.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist zu erwarten; bestätigen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen Proben system vor großangelegten Studien.

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