Anti-BRCA1 Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38398

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BRCA1-Funktion und -Lokalisierung

• BRCA1 ist ein Brustkrebs-Suszeptibilitätsprotein vom Typ 1, das als RING-Finger-Protein und E3-Ubiquitin-Protein-Ligase fungiert und spezifisch die Bildung von 'Lys-6'-verknüpften Polyubiquitinketten vermittelt, was für die DNA-Schadensreparatur und die genomische Stabilität entscheidend ist. Verwandte Referenzen: PMID:10500182, PMID:12887909, PMID:12890688

• Der BRCA1-BARD1-Heterodimer koordiniert die DNA-Schadensreparatur, Ubiquitinierung und transkriptionelle Regulation und gewährleistet so die genomische Integrität. Verwandte Referenzen: PMID:12890688, PMID:14976165, PMID:20351172

• BRCA1 ist für ionisierungsstrahlungsinduzierte Zellzyklusarreste sowohl in der S-Phase als auch in der G2-Phase erforderlich und trägt zu einer ordnungsgemäßen Checkpoint-Kontrolle bei. Verwandte Referenzen: PMID:10724175, PMID:11836499, PMID:12183412

• Es reguliert die zentrosomale Mikrotubuli-Nukleation und beeinflusst die Chromosomensegregation und die mitotische Treue. Verwandte Referenzen: PMID:18056443

• BRCA1 erleichtert die homologe Rekombinationsreparatur durch Interaktion mit PALB2, was das Laden von BRCA2-RAD51 an DNA-Brüchen fördert. Verwandte Referenzen: PMID:19369211

• Darüber hinaus hemmt BRCA1 die Lipidsynthese durch Bindung an inaktives phosphoryliertes ACACA und wirkt als transkriptioneller Aktivator zur Modulation der Genexpression. Verwandte Referenzen: PMID:16326698, PMID:20160719

• Das Protein unterliegt Phosphorylierung und Acetylierung und enthält eine RING-Typ-Zinkfingerdomäne, die für seine E3-Ligase-Aktivität wesentlich ist. BRCA1 lokalisiert sich hauptsächlich im Zellkern und auf den Chromosomen, mit einer gewissen zytoplasmatischen Präsenz. Isoform 1 und 3 sind weit verbreitet exprimiert, während Isoform 3 in Brust- und Eierstockkrebszelllinien oft reduziert oder abwesend ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Bereich innerhalb der Aminosäuren 901-1000; dieser zentrale Bereich kann das全长-BRCA1 und möglicherweise einige Isoformen erkennen.
• Für Western Blots sollten aufgrund der großen Größe des Proteins von ~208 kDa Ganzzelllysate aus Zelllinien mit bekannter BRCA1-Expression (z. B. HeLa, MCF-7) in Betracht gezogen werden; sorgen Sie für geeignete Bedingungen der Gelelektrophorese und des Transfers.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) ist möglicherweise eine Antigen-Retrieval erforderlich; validieren Sie den Antikörper in gefrorenen oder Paraffin-eingebetteten Geweben nach Standardprotokollen.
• Für die Immunfluoreszenz/ICC sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für den Kern- und Zytoplasmnachweis optimiert werden.
• ELISA kann zum Nachweis von rekombinanten BRCA1-Fragmenten oder zum Screening von Antikörpern verwendet werden; erwägen Sie Strategien mit gepaarten Antikörpern für Sandwich-ELISA.

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