YKL-40/CHI3L1 Kaninchen-pAb - P36222

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von YKL-40/CHI3L1

• CHI3L1 (Chitinase-3-like Protein 1), auch bekannt als YKL-40, GP-39, CGP-39 oder HC-gp39, ist ein sezerniertes Glykoprotein aus der Familie der Glykosylhydrolasen 18, dem jedoch die katalytische Chitinaseaktivität fehlt.
• Es fungiert als kohlenhydratbindendes Lektin mit einer Präferenz für Chitin und spielt eine zentrale Rolle beim Gewebeumbau sowie bei der zellulären Anpassung an Umweltveränderungen, insbesondere unter entzündlichen Bedingungen.
• CHI3L1 ist an Entzündungsreaktionen der T-Helferzellen vom Typ 2 (Th2) und an IL-13-induzierten Entzündungen beteiligt und reguliert die Allergensensibilisierung, die Apoptose von Entzündungszellen, die Akkumulation dendritischer Zellen sowie die Differenzierung von M2-Makrophagen.
• In der Lunge reguliert CHI3L1 antibakterielle Reaktionen, indem es zur bakteriellen Abtötung durch Makrophagen beiträgt, die bakterielle Ausbreitung kontrolliert und die Wirtstoleranz verbessert. Außerdem vermittelt es hyperoxieinduzierte Schädigung, Entzündung und Epitheapoptose.
• Auf subzellulärer Ebene wird CHI3L1 hauptsächlich in den extrazellulären Raum sezerniert, kann jedoch auch im Zytoplasma, in der perinukleären Region und im endoplasmatischen Retikulum nachgewiesen werden.
• Die Gewebeexpression ist in aktivierten Makrophagen, Gelenkknorpelzellen, Synovialzellen und der Leber besonders ausgeprägt. In nicht entzündetem Kolon, Muskel, Lunge, Pankreas, mononukleären Zellen und Fibroblasten ist die Expression sehr gering oder nicht nachweisbar.
• Das Protein wird glykosyliert und enthält ein Signalpeptid sowie Disulfidbrücken, die sein scheinbares Molekulargewicht bei der SDS-PAGE beeinflussen können (~43 kDa, höher als die vorhergesagten 42,6 kDa).

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 22–220 und deckt die reife sezernierte Form ab; es wird erwartet, dass der Antikörper endogenes CHI3L1 in humanen, murinen und Rattenproben nachweist.
• Beim Western Blot wird typischerweise eine Bande bei etwa 43 kDa beobachtet. Glykosylierung und andere Modifikationen können geringfügige Verschiebungen verursachen; wenn eine präzise Massenbestätigung erforderlich ist, sollte eine Validierung mit Deglykosylierungsenzymen in Betracht gezogen werden.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigenretrieval-Behandlung erforderlich sein. Zu den Positivkontrollen gehören entzündetes Synovialgewebe, Lebergewebe oder Proben mit einem hohen Anteil aktivierter Makrophagen.
• Bei IF/ICC sollte die zelluläre Lokalisation (sezerniert/zytoplasmatisch) mithilfe geeigneter Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle bestätigt werden. Eine Co-Färbung mit Organellmarkern kann zur Überprüfung der perinukleären oder ER-Lokalisation beitragen.
• ELISA-Anwendungen können zur Quantifizierung von CHI3L1 in biologischen Flüssigkeiten (Serum, Plasma, Zellkulturüberständen) eingesetzt werden; bei der Entwicklung eines Sandwich-ELISAs sollte die Kombination mit einem passenden Detektionsantikörper in Betracht gezogen werden.
• Validieren Sie den Antikörper stets in Ihrem spezifischen Probensystem und unter Ihren Assaybedingungen, da die Leistung durch posttranslationale Modifikationen und Expressionsniveaus variieren kann.

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