XRCC4 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB - Q13426

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: XRCC4-Funktion und Lokalisierung

• Kernfaktor des DNA-nicht-homologen Endverknüpfens (NHEJ), erforderlich für die Reparatur von Doppelstrangbrüchen und V(D)J-Rekombination. Verwandte Referenzen: PMID:10757784 PMID:10854421 PMID:12517771
• Wirkt als Gerüstprotein, das die Rekrutierung anderer Proteine an DNA-Doppelstrangbrüche (DSBs) reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:15385968 PMID:20852255 PMID:26774286
• Assoziiert mit NHEJ1/XLF, um alternierende helikale Filamente zu bilden, die DNA überbrücken und gebrochene Enden zusammenhalten. Verwandte Referenzen: PMID:21768349 PMID:21775435 PMID:22287571
• Der XRCC4-NHEJ1/XLF-Subkomplex bindet in hochgradig diffuser Weise an DNA-Fragmente und hält die Enden für die weitere Verarbeitung zugänglich. Verwandte Referenzen: PMID:27437582
• Schlüsselrolle bei der NHEJ-Ligation: Interagiert mit DNA-Ligase IV (LIG4), um Brüche zu verschließen, stabilisiert LIG4 und verstärkt deren Verknüpfungsaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:10757784 PMID:10854421 PMID:12517771
• Nach Caspase-3-Spaltung translokiert ein C‑terminales Fragment ins Zytoplasma und aktiviert die Phospholipid-Scramblase XKR4, was die Phosphatidylserin-Exposition während der Apoptose fördert. Verwandte Referenzen: PMID:33725486
• Lokalisiert hauptsächlich im Zellkern und auf Chromosomen; während der Apoptose erfolgt eine Umverteilung ins Zytoplasma.
• Weit verbreitet in humanen Geweben exprimiert.
• Annotiert mit den Keywords: DNA-Schaden, DNA-Reparatur, DNA-bindend, Chromosom, Phosphoprotein, Krankheitsvariante und alternatives Spleißen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 1–336) deckt nahezu die vollständige Länge von XRCC4 ab; es erkennt wahrscheinlich sowohl das Voll-Längen-Protein als auch das durch Caspase-3 gespaltene apoptotische Fragment.
• Für WB ist eine Bande bei etwa 38 kDa zu erwarten; in apoptotischen Proben kann ein kleineres Fragment (~30 kDa) auftreten – mit Positiv-/Negativkontrollen validieren.
• Für IHC-P die Antigen-Retrieval- und Fixierungsbedingungen für das jeweilige Gewebe optimieren; die Kernfärbung sollte überwiegen.
• Für IF/ICC ist unter normalen Bedingungen ein nukleäres Signal zu erwarten; zytoplasmatische Färbung kann auf Apoptose hinweisen – mit einem Kernmarker gegengefärbt.
• ELISA kann für den quantitativen Nachweis verwendet werden; für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA die Kombination mit einem Capture-Antikörper in Betracht ziehen.
• Kreuzreaktivität ist für Human und Ratte beschrieben; für andere Spezies vor der Verwendung die Sequenzhomologie überprüfen.

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