XBP1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P17861

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: XBP1-Funktion und -Lokalisierung

• XBP1 liegt in zwei Hauptisoformen vor: die ungespleißte Form (XBP1u) wirkt als schwacher Transkriptionsfaktor und reguliert hauptsächlich die ungefaltete Proteinreaktion (UPR) durch negative Rückkopplung, während die gespleißte Form (XBP1s) ein potenter transkriptioneller Aktivator von UPR-Zielgenen ist. Verwandte Referenzen: PMID:8657566 PMID:16461360 PMID:11779464 PMID:25239945
• XBP1 ist zentral für die ungefaltete Proteinreaktion (UPR), bindet an das ER-Stress-Response-Element (ERSE) und das UPR-Element (UPRE), um ER-Chaperone und ER-assoziierte Abbaubestandteile hochzuregulieren. Verwandte Referenzen: PMID:11779464 PMID:25239945
• Die Produktion von aktivem XBP1s beinhaltet unkonventionelles cytoplasmatisches Spleißen der XBP1-mRNA durch die Endoribonuklease IRE1α (ERN1) bei ER-Stress. Verwandte Referenzen: PMID:19394296 PMID:21233347 PMID:23529610
• XBP1u bietet negative Rückkopplung, indem es XBP1s für den proteasomvermittelten Abbau zielt und so eine Hyperaktivierung der UPR verhindert. Verwandte Referenzen: PMID:16461360 PMID:25239945
• XBP1 lokalisiert sich an die Membran des endoplasmatischen Retikulums und wandert nach Aktivierung in den Zellkern, mit zusätzlichem Vorkommen im Zytoplasma.
• In Immunzellen ist XBP1 essentiell für die Differenzierung von Plasmazellen und die Produktion von Immunglobulinen und wird in rheumatoider Synovialmembran exprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:11460154
• XBP1 trägt zum Krebsfortschreiten bei: Überexpression bei Brustkrebs fördert den epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT) und Metastasierung durch Hochregulierung von SNAI1. Verwandte Referenzen: PMID:25280941
• In Endothelzellen fördert XBP1 die VEGF-induzierte Angiogenese und Proliferation und reguliert die Autophagie durch transkriptionelle Aktivierung von BECN1. Verwandte Referenzen: PMID:23529610 PMID:23184933 PMID:19416856

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Basierend auf dem Immunogen-Design (rekombinantes Protein/synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 277–376 von humanem XBP1 entspricht), kann der Antikörper sowohl die ungespleißte (~29 kDa) als auch die gespleißte (~55 kDa) Isoform erkennen; eine Validierung mit spezifischen Isoform-Kontrollen oder ER-Stress-Induktion (z. B. Tunicamycin) wird empfohlen.
• Für Western Blot (WB) mit diesem kaninchen-polyklonalen Antikörper, trennen Sie die Proteine unter reduzierenden Bedingungen und erwarten Sie ein Band bei ca. 29 kDa für XBP1u; die Induktion von ER-Stress kann das Signal zur größeren gespleißten Form verschieben.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) optimieren Sie die Fixierung (z. B. 4% PFA) und Permeabilisierung (z. B. 0,1% Triton X-100), um die ER-/Kernlokalisierung zu erhalten; Co-Färbung mit Organellmarkern bestätigt die subzelluläre Verteilung.
• Für ELISA kann in Betracht gezogen werden, den Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz gegen rekombinantes XBP1-Protein oder Zelllysate zu verwenden; Titer und Blockierungsbedingungen sollten pro Assay optimiert werden.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist gemeldet; jedoch sollte die Sequenzhomologie innerhalb der Immunogenregion für Ihr spezifisches experimentelles Modell überprüft werden.

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