UPF1/RENT1 Kaninchen pAb - Q92900

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von UPF1/RENT1

• UPF1 (Regulator of nonsense transcripts 1), auch bekannt als RENT1 oder hUpf1, ist eine ATP-abhängige RNA-Helikase und Hauptregulator des nonsense-vermittelten mRNA-Abbaus (NMD), einem Überwachungsweg, der mRNAs mit vorzeitigen Terminationskodons abbaut. Verwandte Referenzen: PMID:11163187 PMID:16086026 PMID:18172165

• Das Enzym katalysiert die ATP-abhängige Entwindung von RNA:DNA-, RNA:RNA- und DNA:DNA-Doppelsträngen in 5'-3'-Richtung, wobei einzelsträngige DNA seine ATPase-Aktivität stark stimuliert. Verwandte Referenzen: PMID:10999600 PMID:18066079 PMID:21419344 PMID:23275559 PMID:26138914 PMID:30218034

• Bei der Translationstermination wird UPF1 zu blockierten Ribosomen rekrutiert und wechselt zwischen phosphorylierten und dephosphorylierten Zuständen; seine Phosphorylierung durch SMG1 ist ein kritischer Schalter, der den NMD auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:11544179 PMID:19417104 PMID:25220460

• Im kanonischen EJC-abhängigen Weg assembliert UPF1 zu einem heterotrimeren SURF-Komplex und bildet anschließend mit UPF2/UPF3 den aktiven Überwachungskomplex, der Ziel-mRNAs zum exonucleolytischen und endonucleolytischen Abbau leitet. Verwandte Referenzen: PMID:21419344 PMID:12554878

• UPF1 wirkt zudem in alternativen NMD-Wegen unabhängig von UPF2/UPF3 und vermittelt den replikationsabhängigen Abbau von Histon-mRNA am Ende der S-Phase. Verwandte Referenzen: PMID:16086026 PMID:18172165 PMID:18447585

• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, in Processing Bodies (P-Bodies), im Zellkern und im perinukleären Bereich.

• UPF1 wird ubiquitär exprimiert, enthält Zinkfinger-Domänen und unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung, Methylierung und Isomerisierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Da das Immunogen der C-terminalen Region (AS 819–1118) entspricht, wird erwartet, dass der Antikörper alle UPF1-Isoformen erkennt und eignet sich für den Nachweis von vollständigen und verkürzten Varianten in WB und IP.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~124 kDa; verwenden Sie reduzierende Bedingungen und validieren Sie mit geeigneten positiven (z. B. HeLa, HEK293) und negativen Kontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC zeigt UPF1 typischerweise ein diffuses zytoplasmatisches und nukleäres punktförmiges Muster; die Permeabilisierungsbedingungen müssen möglicherweise optimiert werden.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte macht diesen Antikörper nützlich für Studien an Nagetiermodellen, dennoch wird eine Validierung im spezifischen Probenystem empfohlen.
• Für ELISA- und IP-Anwendungen kann die poliklonale Natur eine hohe Sensitivität bieten, obwohl eine Titration und Optimierung der Blockierung empfehlenswert sind.

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