UBE2W-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q96B02

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von UBE2W

• UBE2W (auch als UBC-16, UBC16 bekannt) ist ein E2-Ubiquitin-konjugierendes Enzym, das Ubiquitin aus dem E1-Komplex übernimmt und dessen kovalente Anbindung an Substratproteine katalysiert.
  Zugehörige Referenzen: PMID:20061386, PMID:21229326
• Es monoubiquitiniert spezifisch den N-Terminus verschiedener Substrate, darunter ATXN3, MAPT/TAU, POLR2H/RPB8 und STUB1/CHIP, indem es Rückgratatome ungeordneter N-Termini erkennt.
  Zugehörige Referenzen: PMID:23560854, PMID:23696636, PMID:25436519
• UBE2W ist am Abbau fehlgefalteter Chaperon-Substrate beteiligt, indem es die Monoubiquitinierung von STUB1/CHIP vermittelt. Dadurch wird ATXN3 rekrutiert und die Länge der an STUB1/CHIP-Substrate gebundenen Ubiquitinketten begrenzt.
• Nach UV-Bestrahlung fungiert es als spezifisches E2-Enzym für den Fanconi-Anämie-Komplex. Es bindet an FANCL und monoubiquitiniert FANCD2, einen entscheidenden Schritt bei der Reparatur von DNA-Schäden.
  Zugehörige Referenzen: PMID:19111657, PMID:21229326
• UBE2W kann in vitro eine über „Lys-11“ verknüpfte Polyubiquitinierung katalysieren und auch in Abwesenheit aktiver E3-Ligasen funktionieren, wenn auch mit geringerer Geschwindigkeit.
  Zugehörige Referenzen: PMID:25436519
• Untersuchungen zur subzellulären Lokalisation zeigen, dass UBE2W überwiegend im Zellkern vorkommt.
• Es wird in verschiedenen Geweben breit exprimiert, wobei die höchste Expression im Gehirn, in der Leber, der Bauchspeicheldrüse und im Herzen zu beobachten ist.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den Aminosäuren 40–110 des humanen UBE2W entspricht. Dies kann eine Spezifität für das humane Zielprotein bieten; eine Kreuzreaktivität mit Maus wurde beobachtet, was auf eine mögliche Erkennung konservierter Epitope hindeutet.
• Für die Western-Blot-Analyse wird basierend auf dem vorhergesagten Molekulargewicht von UBE2W eine Bande bei etwa 17 kDa erwartet. Vorvalidierte Positivkontrollen wie Lysate von HeLa- oder HEK293-Zellen können aufgrund der ubiquitären Expression von UBE2W geeignet sein.
• Bei ELISA-Anwendungen sollte die Verwendung von rekombinantem UBE2W als Fangantigen in Betracht gezogen und der Antikörper titriert werden, um optimale Arbeitsverdünnungen zu bestimmen.
• Aufgrund der nukleären Lokalisation von UBE2W können wirksame Protokolle zur Kernextraktion erforderlich sein, um eine optimale Detektion in Western Blots von Zellfraktionen zu gewährleisten.

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