UBE2K Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, ELISA - P61086

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von UBE2K

• UBE2K (Ubiquitin-conjugating enzyme E2 K, auch bekannt als HIP2, E2-25K) ist ein E2-Enzym, das Ubiquitin vom E1-Komplex aufnimmt und seine kovalente Bindung an Substratproteine katalysiert. Es spielt eine zentrale Rolle im Ubiquitin-Proteasom-System.
• Es katalysiert die Synthese von Lys-48-verknüpften Polyubiquitinketten, die Proteine typischerweise für den proteasomalen Abbau markieren. Dieses Enzym vermittelt den selektiven Abbau von kurzlebigen und abnormalen Proteinen, einschließlich solcher, die an der endoplasmatischen Retikulum-assoziierten Degradation (ERAD) beteiligt sind.
• UBE2K ubiquitiniert Huntingtin, das Protein, das mit der Huntington-Krankheit in Verbindung gebracht wird, und trägt zur Schaumzellenbildung bei, indem es den Abbau von p53 fördert und dadurch die Apoptose in lipidbeladenen Makrophagen unterdrückt.
• Bei viralen Infektionen wird UBE2K für den Abbau der MHC-Klasse-I-Schwerkette und den HPV E7-abhängigen Abbau von RB1 missbraucht, was seine Rolle bei Immunevasion und onkogener Transformation unterstreicht.
• Das Protein ist hauptsächlich im Zytoplasma lokalisiert, was mit seiner Rolle bei zytosolischen Ubiquitinierungsereignissen übereinstimmt.
• UBE2K erfährt posttranslationale Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität regulieren können; alternatives Spleißen erzeugt zusätzliche Isoformen.
• Es wird in allen menschlichen Geweben exprimiert, mit hoher Expression im Gehirn, insbesondere im Kortex und Striatum – Regionen, die von neurodegenerativen Erkrankungen betroffen sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid, das die Aminosäuren 1-100 von humanem UBE2K umfasst und die N-terminale Region targetiert. Erwarten Sie eine Reaktivität gegen das volllängige Protein (22 kDa) im Western Blot.
• Für Western Blot titrieren Sie den Antikörper zwischen einer Verdünnung von 1:500 und 1:2000 und optimieren Sie je nach Probe und Nachweissystem. Verwenden Sie geeignete positive (z. B. HeLa-Zellysat) und negative Kontrollen.
• Dieser Antikörper ist für ELISA validiert; für indirekte ELISA bestimmen Sie die optimale Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnung empirisch.
• Da die Kreuzreaktivität nur für humanes UBE2K bestätigt ist, validieren Sie den Antikörper bei Bedarf in anderen Spezies – Sequenzhomologie kann eine Kreuzreaktivität ermöglichen.
• Polyclonale Antikörper können Charge-zu-Charge-Variabilität aufweisen; verwenden Sie interne Referenzstandards für Reproduzierbarkeit.

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