TSPAN15-Kaninchen-pAb für WB und ELISA - O95858

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von TSPAN15

• Tetraspanin-15 (Tspan-15), auch bekannt als NET-7 oder TM4SF15, ist ein Mitglied der Tetraspanin-Familie und gehört zur TspanC8-Untergruppe, die aus sechs Mitgliedern besteht, die direkt mit der Transmembran-Metalloprotease ADAM10 interagieren. Verwandte Literatur: PMID:26686862, PMID:30463011, PMID:31792032
• Tspan-15 ist für den Austritt von ADAM10 aus dem endoplasmatischen Retikulum, die enzymatische Reifung, den Transport zur Zelloberfläche und die Bestimmung der Substratspezifität erforderlich. Verschiedene TspanC8/ADAM10-Komplexe weisen unterschiedliche Substratpräferenzen auf. Verwandte Literatur: PMID:26686862, PMID:30463011, PMID:31792032
• TSPAN15 fördert die ADAM10-vermittelte Spaltung von CDH2 (N-Cadherin) und beeinflusst dadurch die Zelladhäsion und Zellmigration. Verwandte Literatur: PMID:34739841
• Das Protein reguliert die durch Liganden induzierte Aktivität der Notch-Signalübertragung negativ, wahrscheinlich durch Modulation der ADAM10-Aktivität. Verwandte Literatur: PMID:26686862, PMID:31792032
• TSPAN15 ist hauptsächlich in der Zellmembran und der Membran später Endosomen lokalisiert.
• Das Protein enthält mehrere Transmembranhelices und Disulfidbrücken und wird als Glykoprotein klassifiziert. Seine molekulare Masse im reifen Zustand beträgt etwa 33 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 110–220 des menschlichen TSPAN15 und liegt innerhalb der großen extrazellulären Schleife (EC2), die entscheidende Protein-Protein-Interaktionen vermittelt. Dieses Design kann die Erkennung nativer Konformationen in Ganzzellkontexten begünstigen.
• Berücksichtigen Sie beim WB die vorhergesagte Molekülmasse von etwa 33 kDa und validieren Sie den Nachweis mit geeigneten Positivkontrollen, beispielsweise Zelllinien, die ADAM10-/TspanC8-Komponenten exprimieren. Aufgrund der polyklonalen Eigenschaften können Hintergrundbanden auftreten; eine Vorabsorption oder eine optimierte Blockierung kann geprüft werden.
• Beim ELISA können das rekombinante Immunogen oder ein synthetisches Peptid, das die Zielregion abdeckt, als positive Beschichtungsantigene dienen. Bestätigen Sie die Reaktivität gegenüber dem nativen Protein in Lysaten oder gereinigten Membranen aus menschlichen, Maus- oder Rattenproben.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wird aufgrund der hohen Sequenzhomologie in der Immunogenregion erwartet; dennoch sollte die Spezifität mithilfe von Knockout- oder Knockdown-Modellen überprüft werden.
• Die Fähigkeit des Antikörpers, den ADAM10-TSPAN15-Komplex unter nativen Bedingungen zu immunpräzipitieren, wurde nicht getestet. Falls diese Anwendung erforderlich ist, sollten die Pufferbedingungen optimiert werden.

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