TrkA Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P04629

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: TrkA/NTRK1 Funktion und Lokalisierung

• TrkA (Hochaffiner Nervenwachstumsfaktor-Rezeptor) ist ein Rezeptor-Tyrosinkinase, die als primärer Rezeptor für den Nervenwachstumsfaktor (NGF) dient. Nach NGF-Bindung unterliegt TrkA einer Dimerisierung und Autophosphorylierung und initiiert Signalwege, die das neuronale Überleben, die Differenzierung und die Proliferation während der Entwicklung des Nervensystems steuern. Verwandte Referenzen: PMID:1281417, PMID:15488758, PMID:17196528
• Downstream-Signalkaskaden umfassen GRB2-Ras-MAPK (Zelldifferenzierung und Überleben), PI3K-AKT (Überleben) und PLCG1-NF-kappa-B (Transkription von Überlebensgenen).
• TrkA lokalisiert an der Zellmembran und wird nach Aktivierung in frühe, späte und rezyklierende Endosomen internalisiert.
• Es existieren mehrere Isoformen: TrkA-I ist weitgehend in nicht-neuronalen Geweben exprimiert, TrkA-II ist neuronenspezifisch und TrkA-III wird in neuralen Stamm-/Vorläuferzellen exprimiert. TrkA-III fördert die Angiogenese und besitzt onkogene Aktivität bei Überexpression.
• TrkA ist ein Proto-Onkogen, das einer Autophosphorylierung und Ubiquitinierung unterliegt. Es verfügt über immunglobulinähnliche Domänen, Leucin-reiche Wiederholungen und eine Tyrosinkinase-Domäne.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 700-796) befindet sich im intrazellulären Bereich von TrkA, was bei der Erkennung des C-terminalen Teils des Rezeptors helfen kann. Berücksichtigen Sie diesen Epitop-Ort bei der Planung Ihrer experimentellen Protokolle.
• Für Western Blotting sind normalerweise denaturierende und reduzierende Bedingungen geeignet. Validieren Sie mit positiven Kontrollen wie PC12 (Ratte) oder SH-SY5Y (Mensch) Zelllysaten und beobachten Sie eine Bande um 87 kDa.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Schritte die Detektion verbessern. Testen Sie an neuronalem Gewebe, wo eine TrkA-Expression erwartet wird.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit humanen, murinen und rattischen Orthologen ermöglicht die Verwendung in diversen präklinischen Modellen; bestätigen Sie die Spezifität in Ihrem Modellsystem.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie die Verwendung von rekombinanten TrkA-Proteinen oder Zelllysaten zur Optimierung des Assays in Betracht ziehen.

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