TriMethyl-Histon H4-K20 Kaninchen monoklonaler Antikörper (P62805) für WB, IHC-P, IF/ICC

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H4-Funktion und Lokalisierung

Histon H4 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, der grundlegenden Wiederholungseinheit des Chromatins. Es wickelt und verdichtet DNA und schränkt so die Zugänglichkeit für zelluläre Maschinerien ein, die DNA als Vorlage benötigen. Folglich spielt H4 eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Verwandte Referenzen: UniProt:P62805

Der N-terminale Schwanz von Histon H4, einschließlich Lysin 20 (K20), unterliegt einer Vielzahl posttranslationaler Modifikationen – Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und mehr – die den "Histon-Code" bilden. Diese Modifikationen regulieren dynamisch die Chromatinstruktur und Genexpression. Verwandte Referenzen: PMID:12086618, PMID:17967882

Speziell ist die Trimethylierung an Lysin 20 (H4K20me3) eine gut charakterisierte epigenetische Markierung, die hauptsächlich mit konstitutivem Heterochromatin assoziiert ist, zur Genstummschaltung beiträgt und die Genomstabilität aufrechterhält. Diese Modifikation wird durch Methyltransferasen wie SUV420H1 und SUV420H2 katalysiert. Verwandte Referenzen: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882, PMID:32209475

Subzellulär ist Histon H4 überwiegend im Zellkern und auf Chromosomen lokalisiert. Während der Spermatogenese zeigt acetyliertes H4 eine verstärkte Kernretention in Spermatiden der Stufe 11. Verwandte Referenzen: UniProt:P62805

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser Antikörper ein methylierungsspezifisches Epitop erkennt, stellen Sie sicher, dass Blockierungs- und Waschpuffer die Stabilität der Methylgruppe erhalten. Magermilchpulver oder BSA können verwendet werden, vermeiden Sie jedoch harsche Stripping-Bedingungen, die die Modifikation verändern könnten.
• Für Western Blot sollten Sie säureextrahiertes Histon oder kernangereicherte Lysate verwenden, um das Signal von Histonmodifikationen zu verstärken, und Proben auf hochprozentigen (15% oder Gradienten) SDS-PAGE-Gelen laufen lassen, um eine optimale Auflösung des 11 kDa H4-Proteins zu erreichen.
• Bei IHC-P sind Standard-Antigenretrieval-Methoden (z.B. Citratpuffer pH 6.0) typischerweise kompatibel; validieren Sie jedoch in Gewebeschnitten, von denen bekannt ist, dass sie H4K20me3-Markierungen exprimieren, wie z.B. heterochromatische Regionen.
• Für ELISA- oder Dot-Blot-Anwendungen sollten nicht-methylierte und mono-/di-methylierte Peptidkontrollen eingeschlossen werden, um die Trimethyl-Spezifität zu bestätigen.
• Dieses rekombinante Kaninchen-Monoklonalformat bietet eine hohe Reproduzierbarkeit für Langzeitstudien; validieren Sie die Verdünnungsfaktoren in Ihrem relevanten Proben-System.

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