TriMethyl-Histone H3-K4 Rabbit mAb - Q16695/P68431 - WB, IHC-P, IF, ChIP Antikörper

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von TriMethyl-Histone H3-K4

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms. Nukleosomen wickeln und verdichten DNA zu Chromatin und spielen so eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die Zugänglichkeit der DNA wird durch einen komplexen Satz posttranslationaler Modifikationen, bekannt als der Histon-Code, und durch Nukleosom-Remodelling reguliert.
Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Die Trimethylierung von Histon H3 an Lysin 4 (H3K4me3) ist eine epigenetische Markierung, die mit aktiven Genpromotoren und dem Transkriptionsstart assoziiert ist. Diese Modifikation wird durch Histon-Methyltransferasen katalysiert und von verschiedenen chromatinbindenden Proteinen erkannt.
Verwandte Referenzen: PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708

Histon H3 ist vorwiegend im Zellkern lokalisiert und assoziiert während der Zellteilung mit Chromosomen. Das H3.1t-Variant (Q16695) wird in Hodenzellen exprimiert, während das kanonische H3.1 (P68431) ubiquitär exprimiert wird.
Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Mehrere posttranslationale Modifikationen an Histon H3, einschließlich Methylierung, Acetylierung, Phosphorylierung und Citrullinierung, regulieren dynamisch die Struktur und Funktion des Chromatins. Die H3K4-Stelle unterliegt spezifisch Mono-, Di- und Trimethylierung, wobei die Trimethylierung ein Kennzeichen für die aktive Transkription ist.
Verwandte Referenzen: PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das der trimethylierten K4-Region von menschlichem Histon H3 entspricht. Dies stellt die spezifische Erkennung der H3K4me3-Markierung sicher.
• Für Western Blotting (WB) kann eine Bande bei ca. 15 kDa, die dem Molekulargewicht von Histon H3 entspricht, nachgewiesen werden. Dieser Antikörper wird auch für Anwendungen wie IHC-P, IF/ICC, ELISA und ChIP empfohlen. Forscher sollten die Verdünnung und die Assay-Bedingungen in ihrem experimentellen System optimieren.
• Es wird vorhergesagt, dass der Antikörper aufgrund der hohen Sequenzkonservierung der H3K4-Region mit Maus und Ratte kreuzreagiert; eine vorläufige Validierung in der entsprechenden Spezies wird empfohlen.
• Bei der Durchführung von ChIP wurde berichtet, dass der Antikörper DNA-Sequenzen anreichert, die mit H3K4me3 assoziiert sind; er eignet sich zur Untersuchung von Promotorregionen und aktiven Genen.
• Wie bei jedem Antikörper, der spezifisch für posttranslationale Modifikationen ist, sollte die Spezifität mit geeigneten Kontrollen bestätigt werden (z. B. Peptid-Kompetition, genetischer Knockout/Knockdown oder Behandlung mit Hemmstoffen für histonmodifizierende Enzyme).

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