Schilddrüsen-Peroxidase Kaninchen monoklonaler Antikörper für IHC-P/ELISA - P07202

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Schilddrüsen-Peroxidase

• Die Schilddrüsen-Peroxidase (TPO) ist ein Schlüsselenzym in der Biosynthese von Schilddrüsenhormonen; sie katalysiert die Iodierung und Kopplung hormonogener Tyrosine im Thyreoglobulin, um die aktiven Hormone T3 und T4 zu produzieren.
• TPO ist ein Transmembran-Glykoprotein, das auf der apikalen Membran der Schilddrüsenfollikelzellen lokalisiert ist, wobei seine enzymatische Domäne dem Follikellumen zugewandt ist.
• Das Protein enthält eine Häm-Prosthetische Gruppe, die für seine Peroxidaseaktivität essentiell ist, sowie Calcium- und Eisenbindungsstellen, Disulfidbrücken und EGF-ähnliche Domänen, die zur strukturellen Stabilität beitragen.
• Mehrere Spleißvarianten von TPO wurden identifiziert, von denen einige sekretierte oder anders lokalisierte Isoformen produzieren können, obwohl die vollständige, membrangebundene Form vorherrscht.
• TPO ist ein wichtiges Autoantigen bei autoimmunen Schilddrüsenerkrankungen wie der Hashimoto-Thyreoiditis und dem Morbus Basedow; Mutationen im TPO-Gen können angeborene Hypothyreose verursachen.
• Der UniProt-Eintrag klassifiziert TPO als Peroxidase, Oxidoreduktase und Schilddrüsenhormon-Biosyntheseprotein mit Nachweis auf Proteinebene durch Proteomics-Identifikation.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-Glykosylierung, die für die richtige Faltung und die enzymatische Aktivität wichtig ist.
• Die TPO-Expression ist weitgehend auf die Schilddrüse beschränkt, was sie zu einem spezifischen Marker für Schilddrüsengewebe in der Immunhistochemie macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen den N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1-100) des menschlichen TPO entworfen, was ein Epitop zielen könnte, das über Mensch, Maus und Ratte hinweg konserviert ist.
• Für IHC-P sind Antigen-Retrieval-Methoden wie die hitzeinduzierte Epitop-Retrieval in Citratpuffer (pH 6,0) oft für Membranproteine vorteilhaft; validieren Sie dies bei Ihrem spezifischen Gewebetyp.
• Verwenden Sie im ELISA rekombinantes TPO oder gereinigte Thyreoglobulin-Fraktionen als Beschichtungsantigen; erwägen Sie eine Blockierung mit Magermilch oder BSA, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Da der Antikörper monoklonal ist, wird eine Chargen-zu-Chargen-Konsistenz erwartet; dennoch sollten optimale Arbeitsverdünnungen experimentell für jede Anwendung und jedes Probensystem ermittelt werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde bestätigt, was den Einsatz in Nagetier-Modellen für Schilddrüsenforschung ermöglicht; verifizieren Sie dies per Western Blot oder IHC an entsprechenden Geweben.

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