THOC4/ALYREF Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q86V81

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von THOC4/ALYREF

• THOC4/ALYREF (auch bekannt als ALY, BEF, REF, THOC4) ist die Untereinheit 4 des THO-Komplexes, ein Adapter für den mRNA-Export und eine Schlüsselkomponente des TREX-Komplexes (Transkription/Export), der Transkription, Prozessierung und nukleären Export gespleißter mRNA miteinander verbindet (PubMed:15833825, PubMed:15998806, PubMed:17190602). Verwandte Referenzen: PMID:15833825, PMID:15998806, PMID:17190602
• Das Protein bindet spezifisch stromaufwärts des Exon-Junction-Komplexes (EJC) an gespleißte mRNA und wird auf spleiß- und cap-abhängige Weise rekrutiert, wodurch der mRNA-Export über den TAP/NXF1-Signalweg erleichtert wird (PubMed:15833825, PubMed:15998806, PubMed:17190602). Verwandte Referenzen: PMID:15833825, PMID:15998806, PMID:17190602
• THOC4/ALYREF fördert außerdem den nukleären Export intronloser mRNA, einschließlich HSP70-mRNA und m5C-haltiger mRNA, indem es spezifische Modifikationen erkennt und Wechselwirkungen mit DDX39B und NXF1-NXT1 vermittelt (PubMed:17984224, PubMed:19165146, PubMed:28418038). Verwandte Referenzen: PMID:17984224, PMID:19165146, PMID:28418038
• Über den mRNA-Export hinaus wirkt es als Chaperon, das die Dimerisierung von bZIP-Transkriptionsfaktoren fördert und dadurch die transkriptionelle Aktivierung verstärkt; außerdem ist es an der Transkriptionselongation und der Genomstabilität beteiligt (PubMed:10488337, PubMed:12438613). Verwandte Referenzen: PMID:10488337, PMID:12438613
• Das Protein ist überwiegend im Zellkern und in nukleären Speckles lokalisiert, kann jedoch auch im Zytoplasma gefunden werden, was seine dynamische Rolle beim Transport und Stoffwechsel von mRNP widerspiegelt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Citrullinierung, Methylierung und Phosphorylierung, was auf Regulationsmechanismen hindeutet, die seine Aktivität und Wechselwirkungen modulieren können.
• THOC4/ALYREF wird in einer Vielzahl von Krebsarten exprimiert, was auf seine potenzielle Bedeutung in der Krebsbiologie sowie als Ziel für diagnostische oder therapeutische Anwendungen hindeutet.
• Im Kontext von Infektionen wird der TREX-Komplex für den Export intronloser KSHV-mRNA gekapert, und THOC4/ALYREF vermittelt die Rekrutierung des Komplexes zu viralen mRNA, was für die Virusproduktion unerlässlich ist.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 158–257 des menschlichen THOC4/ALYREF entspricht. Diese Region kann einen Antikörper erzeugen, der sowohl menschliche als auch Nagetierformen erkennt, wie durch die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte angezeigt wird.
• Für den Western Blot (WB) sollte eine Ausgangsverdünnung von 1:1000–1:5000 in Betracht gezogen und im jeweiligen Probensystem validiert werden. Es wird eine Bande bei etwa 27 kDa erwartet.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollte der Antikörper an paraffineingebetteten Schnitten mit geeigneter Antigen-Retrieval-Methode getestet werden. Die Färbespezifität sollte mit positiven und negativen Kontrollen validiert werden.
• Für den ELISA sollten Beschichtungsantigen und Antikörperkonzentration für das beste Signal-Rausch-Verhältnis optimiert werden.
• Das Format als monoklonaler Kaninchenantikörper gewährleistet eine hohe Konsistenz und Reproduzierbarkeit zwischen den Experimenten.

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