Symmetrisches DiMethyl-Histon H4-R3 Kaninchen monoklonaler Antikörper (P62805) für epigenetische Forschung

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Histon H4 Funktion und Lokalisierung

Histon H4 ist eines der Kernhistone, die das eukaryotische Nukleosom bilden, um das die DNA gewickelt ist, um Chromatin zu formen. Es spielt eine grundlegende Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die dynamische posttranslationale Modifikation von Histonen, oft als "Histon-Code" bezeichnet, steuert die Zugänglichkeit der DNA für regulatorische Proteine und ist zentral für die epigenetische Kontrolle. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Histon H4 ist hauptsächlich im Zellkern lokalisiert und assoziiert mit Chromosomen. Während der Spermatogenese ist acetyliertes H4 im Zellkern in Schritt-11-Spermatozyten lokalisiert. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Histon H4 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und anderen. Die symmetrische Dimethylierung an Arg3 (SDMA-H4R3) wird durch Protein-Arginin-Methyltransferasen PRMT5 und PRMT7 katalysiert und ist an der Transkriptionsregulation beteiligt. Verwandte Referenzen: UniProt P62805

Zusätzliche Modifikationen umfassen asymmetrische Dimethylierung und Citrullinierung an Arg3, Acetylierung an mehreren Lysinresten (z.B. K5, K8, K12, K16) und Phosphorylierung an spezifischen Serin- und Tyrosinresten. Diese kombinatorischen Markierungen definieren unterschiedliche Chromatinzustände. Verwandte Referenzen: PMID:11387442 PMID:11448779 PMID:15345777 PMID:16567635 PMID:21724829 PMID:15592455 PMID:20068231

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die N-terminalen 1-100 Aminosäuren von humanem Histon H4 abdeckt, was den Arg3-Rest einschließt, der symmetrisch dimethyliert ist. Stellen Sie bei der Versuchsplanung sicher, dass die Spezifität des Antikörpers für diese Modifikation durch geeignete Peptid-Kompetitions- oder Mutantenkontrollen verifiziert wird.
• Für Western Blot (WB) sollten Nuklearextrakte aus humanen oder Ratten-Zelllinien verwendet werden. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~11 kDa. Validieren Sie die Bandengröße und Spezifität in Ihrem Proben-System.
• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) können standardmäßige Nukleus-Färbeprotokolle erforderlich sein. Eine Co-Färbung mit DNA-Farbstoffen wie DAPI kann die nukleäre Lokalisierung bestätigen.
• Dot Blot (DB) und ELISA können zur Quantifizierung der symmetrischen Dimethyl-H4R3-Spiegel in Histonpräparationen oder Zelllysaten eingesetzt werden. Diese Assays sind nützlich für das Hochdurchsatz-Screening von Methylierungsinhibitoren oder -aktivatoren.

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