Symmetrisch DiMethyl-Histon H3-R2 Kaninchen Polyklonales Antikörper (Q16695/P68431) für WB, IHC, IF, ELISA, ChIP-seq

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Histon H3

Histon H3 ist eines der Kernhistonproteine, das zusammen mit H2A, H2B und H4 das Nukleosomenkernpartikel bildet. Nukleosomen wickeln und komprimieren DNA zu Chromatin und spielen eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695, UniProt P68431

Sowohl Histon H3.1 (kodiert von mehreren Genen einschließlich H3C1, H3C2 usw.) als auch H3.1t (kodiert von H3-4) werden in menschlichen Zellen exprimiert, wobei H3.1t überwiegend in Hodenzellen vorkommt. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695

Histone unterliegen einer Vielzahl von posttranslationalen Modifikationen (PTMs), einschließlich Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung und mehr, die gemeinsam als „Histon-Code“ bezeichnet werden. Diese Modifikationen regulieren die Chromatinstruktur und Genexpression. Unter ihnen wird die symmetrische Dimethylierung von Argininresten durch Protein-Arginin-Methyltransferasen wie PRMT5 katalysiert. Beispielsweise wurde die symmetrische Dimethylierung an Histon H3 Arginin 9 (H3R9me2s) beschrieben. Dieser Antikörper erkennt spezifisch symmetrisch dimethyliertes Arginin 2 (H3R2me2s), eine Modifikation, die eine Rolle bei der epigenetischen Regulation spielen kann. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches symmetrisch dimethyliertes Peptid um Position R2, was eine hohe Spezifität für die H3R2me2s-Modifikation gewährleistet. Bei der Western Blotting kann die Anreicherung von Histonen in Kernextrakten oder säureextrahierte Histone die Detektion verbessern.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Antigen-Retrieval und Permeabilisierungsbedingungen für jeden Gewebe- oder Zelltyp optimiert werden.
• In ChIP-seq-Experimenten sollten Sie Kontrollreaktionen wie Input-DNA, IgG-Kontrolle und eventuell Peptid-Konkurrenz hinzufügen, um die Bindungsspezifität zu bestätigen. Spike-in-Kontrollen können für die quantitative Normalisierung nützlich sein.
• ELISA-basierte Verfahren können zur quantitativen Bestimmung von H3R2me2s-Spiegeln in Zelllysaten oder gereinigten Histonpräparaten verwendet werden; sorgen Sie für eine gleichmäßige Proteinbeladung und erwägen Sie die Verwendung eines Pan-H3-Antikörpers zur Normalisierung.
• Kreuzreaktivität wurde für Mensch, Maus, Ratte und weitere Spezies berichtet (breites Spektrum vorausgesagt). Dennoch wird eine Validierung in Ihrem spezifischen Probenystem empfohlen.

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