Symmetrisches DiMethyl-Histon H3-R17 Kaninchen monoklonaler Antikörper (Q16695/P68431) für WB, DB, IHC-P, ELISA

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Histon H3

Histon H3 ist eine Kernkomponente des Nukleosoms, die DNA wickelt und zu Chromatin verdichtet. Diese Verdichtung begrenzt die Zugänglichkeit der DNA für die zelluläre Maschinerie und spielt eine zentrale Rolle bei der Transkriptionsregulation, DNA-Reparatur, DNA-Replikation und chromosomalen Stabilität. Die DNA-Zugänglichkeit wird dynamisch durch posttranslationale Modifikationen (PTMs) an Histonen, kollektiv als „Histon-Code“ bezeichnet, zusammen mit Nukleosom-Remodelling reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:19608861, PMID:17194708

H3 lokalisiert im Zellkern und ist mit Chromosomen assoziiert. Zwei wichtige menschliche Isoformen werden durch die SWISS-Einträge Q16695 (Histon H3.1t, testisspezifisch) und P68431 (Histon H3.1, weit verbreitet exprimiert) repräsentiert. Während H3.1t vorwiegend in Hodenzellen exprimiert wird, ist das kanonische H3.1 in den meisten Geweben vorhanden, was die isoformspezifische Regulation der Chromatinfunktionen unterstreicht. Verwandte Referenzen: UniProt Q16695 Gewebespezifität

Die Arginin-Methylierung von Histonen, einschließlich der symmetrischen Dimethylierung, ist ein kritisches PTM. Das Enzym PRMT5 katalysiert die symmetrische Dimethylierung von Argininresten, wie die gut charakterisierte R9-Stelle, und beeinflusst die Transkriptionsregulation und Chromatinorganisation. Die symmetrische Dimethylierung an R17 von Histon H3, das Ziel dieses Antikörpers, stellt eine verwandte Modifikation innerhalb der Landschaft der Histon-Methylierung dar. Obwohl die spezifischen Funktionen der symmetrisch dimethylierten R17 weniger etabliert sind, beteiligt sie sich wahrscheinlich an der Genaktivierung oder -silencing, abhängig vom genomischen Kontext. Verwandte Referenzen: PMID:16267050, PMID:17194708

Zahlreiche weitere Modifikationen verzieren H3, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung, Citrullinierung und ADP-Ribosylierung, jede mit dedizierten enzymatischen Maschinerien und unterschiedlichen funktionellen Ergebnissen. Dieser Antikörper bietet ein Werkzeug, um die präzise Rolle des symmetrisch dimethylierten R17 im komplexen Histon-Code zu untersuchen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Bestätigen Sie die Antikörperspezifität mittels Peptid-Wettbewerbsassays; erwägen Sie, den Antikörper sowohl mit dem symmetrisch dimethylierten R17-Peptid als auch mit dem nicht-modifizierten Gegenstück zu inkubieren, um die modifikationsspezifische Bindung zu validieren.
• Für Western Blot, reichern Sie Kernproteinfraktionen an, um das Signal zu verstärken, und verifizieren Sie das erwartete ~15 kDa Band in relevanten Zelllysaten (z. B. HeLa, Hodengewebe bei Verwendung der H3.1t-Isoform).
• Bei IHC-P-Anwendungen optimieren Sie die Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0 oder EDTA pH 9,0) und fügen Sie Negativkontrollen (Kaninchen-IgG-Isotyp) hinzu, um die Spezifität der dimorphonukleären Färbung sicherzustellen.
• ELISA-basierte Nachweise können unter Verwendung von modifizierten und unmodifizierten Peptiden als Beschichtungsantigene durchgeführt werden; validieren Sie Linearität und Empfindlichkeit im entsprechenden Konzentrationsbereich.
• Die Kreuzreaktivität ist über einen breiten Spektrum von Arten vorhergesagt; validieren Sie stets im spezifischen Probensystem von Interesse, um die erwartete Erkennung des endogenen symmetrisch dimethylierten H3-R17 sicherzustellen.

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