STAT5A Kaninchen mAb für WB, ELISA - P42229

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von STAT5A

• STAT5A (Signal Transducer and Activator of Transcription 5A) ist ein Transkriptionsfaktor, der eine entscheidende Rolle bei der Zytokin- und Wachstumsfaktor-Signalgebung spielt.
• Es vermittelt zelluläre Antworten auf KITLG/SCF, ERBB4 und aktivierte FGFRs und überträgt Signale von der Zelloberfläche in den Zellkern.
• Nach Aktivierung bindet STAT5A an GAS-Elemente in den Promotoren von Zielgenen und reguliert die Transkription von Genen, die an Zellproliferation, Differenzierung und Überleben beteiligt sind.
• Im Zytoplasma ist STAT5A inaktiv; Zytokin-Stimulation führt zur Phosphorylierung und Dimerisierung, gefolgt von der Translokation in den Zellkern, wo es als DNA-bindender Transkriptionsaktivator wirkt.
• Es ist essenziell für die Laktation, da es die Expression von Milchproteingenen als Antwort auf Prolaktin reguliert.
• STAT5A gehört zur STAT-Proteinfamilie und enthält eine SH2-Domäne, die für seine Rekrutierung an phosphorylierte Rezeptoren und die nachfolgende Aktivierung kritisch ist.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Ubiquitinierung, modulieren seine transkriptionelle Aktivität und Stabilität.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das dem N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1-100) von menschlichem STAT5A entspricht. Es wird nicht erwartet, dass dieser Bereich die SH2-Domäne oder die DNA-Bindungsdomäne beeinträchtigt, sodass der Antikörper ungehindert auf native Epitope zugreifen kann.
• Für die Western Blotting (WB) ist eine Bande von etwa 91 kDa in menschlichen und murinen Zelllysaten zu erwarten. Erwägen Sie die Verwendung von kernangereicherten Extrakten zur Verbesserung der Detektion, da STAT5A nach Aktivierung in den Zellkern transloziert.
• Aufgrund der hohen Homologie zwischen menschlichem und murinem STAT5A weist der Antikörper nachweislich Kreuzreaktivität mit Mausproben auf. Validieren Sie ihn im relevanten Gewebe oder der entsprechenden Zelllinie, wie z. B. Brustdrüse oder Immunzellen.
• Für ELISA-Anwendungen kombinieren Sie diesen monoklonalen Antikörper mit einem passenden Detektionsantikörper, der ein anderes Epitop erkennt, und optimieren Sie Beschichtungs- und Detektionsbedingungen.
• Dieses Produkt wird als kaninchen monoklonaler Antikörper geliefert; verwenden Sie daher geeignete Anti-Kaninchen Sekundärantikörper für die Detektion.
• Fügen Sie immer passende Positiv- und Negativkontrollen hinzu und befolgen Sie die mitgelieferten Versand- und Lagerhinweise, um die Integrität des Antikörpers zu erhalten.

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