SPARC Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09486

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SPARC-Funktion und -Lokalisierung

• SPARC (Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine), auch bekannt als Osteonectin oder Basement-membrane protein 40 (BM-40), ist ein multifunktionales matrikuläres Glykoprotein.
• Es reguliert das Zellwachstum und die Adhäsion durch Wechselwirkungen mit extrazellulären Matrixkomponenten und Zytokinen.
• Das Protein enthält eine saure Domäne, die mit niedriger Affinität 5 bis 8 Calciumionen bindet, und eine EF-Hand-Schleife, die mit hoher Affinität ein einzelnes Calciumion bindet; es bindet auch Kupfer und mehrere Kollagentypen, Albumin, Thrombospondin, PDGF und Zellmembranen.
• SPARC wird in den extrazellulären Raum sezerniert und lokalisiert in der Basalmembran und der extrazellulären Matrix.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbindungen und N-verknüpfte Glykosylierung; es besitzt ein Signalpeptid für die Sekretion.
• Genetische Varianten in SPARC sind mit Osteogenesis imperfecta assoziiert, und das Protein wurde durch zahlreiche Proteomik-Studien identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 18–303 von humanem SPARC und deckt den Großteil des reifen Proteins ab; berücksichtigen Sie sein Potenzial, mehrere Epitope zu erkennen.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~35 kDa; validieren Sie mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen in Ihrem Proben-System.
• Bei der Immunhistochemie (paraffineingebettet) kann eine Antigen-Demaskierung erforderlich sein; testen Sie an bekannten positiven Geweben wie Knochen, Haut oder Plazenta.
• Für die Immunfluoreszenz stellen Sie sicher, dass eine Permeabilisierung durchgeführt wird, wenn intrazelluläre Pools anvisiert werden, obwohl SPARC hauptsächlich sezerniert wird.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte deutet auf Eignung für artenübergreifende Studien hin; überprüfen Sie die Leistung in Ihrem spezifischen Versuchsaufbau.

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