SNX4 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - O95219

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SNX4-Funktion und -Lokalisierung

• SNX4, oder Sortiernexin-4, ist ein Mitglied der Sortiernexin-Proteinfamilie, die durch das Vorhandensein einer Phox-Homologie-(PX)-Domäne gekennzeichnet ist, die die Bindung von Phosphoinositiden und die Membranassoziation erleichtert.
• SNX4 spielt eine zentrale Rolle bei der Regulierung der Endozytose und mehrerer Stadien des intrazellulären Transports (PubMed:12668730, PubMed:17994011, PubMed:32513819). Verwandte Referenzen: PMID:12668730 PMID:17994011 PMID:32513819
• Es ist spezifisch am Recycling des endozytierten Transferrinrezeptors beteiligt, verhindert dessen lysosomale Degradation und erhält so die Eisenhomöostase aufrecht (PubMed:17994011). Verwandte Referenzen: PMID:17994011
• SNX4 trägt zur Autophagosomen-Biogenese bei, indem es den Transport und das Recycling der Phospholipid-Scramblase ATG9A vermittelt, eines für die Autophagie erforderlichen Schlüsselproteins (PubMed:32513819, PubMed:33468622). Verwandte Referenzen: PMID:32513819 PMID:33468622
• Subzellulär lokalisiert SNX4 hauptsächlich an der cytoplasmatischen Seite von frühen Endosomenmembranen, wo es an der Frachtsortierung und Vesikelbildung teilnimmt.
• Posttranslationale Modifikationen von SNX4 umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität, Lokalisierung oder Proteininteraktionen regulieren können.
• Das SNX4-Gen unterliegt alternativem Spleißen, was zu mehreren Transkriptvarianten führt, die möglicherweise unterschiedliche Proteinisoformen mit potenziell verschiedenen Funktionen kodieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht einem rekombinanten Fragment, das die Aminosäuren 321–400 von humanem SNX4 in der Nähe der C-terminalen Region abdeckt, was die Erkennung von nativen und denaturierten Proteinkonformationen ermöglichen kann.
• Für Western Blotting: Bereiten Sie Ganzzelllysate mit Standard-RIPA- oder SDS-Probenpuffer zu; unter reduzierenden Bedingungen ist ein Proteinband bei etwa 52 kDa zu erwarten. Ziehen Sie in Betracht, eine positive Kontrolle wie HeLa- oder HEK293T-Zellextrakte, die endogenes SNX4 exprimieren, mit einzuschließen.
• Bei Immunpräzipitations-Assays: Optimieren Sie das Antikörper-zu-Lysat-Verhältnis und verwenden Sie ein kompatibles Bead-System (z.B. Protein A/G-Agarose) für Kaninchen-IgGs. Validieren Sie die Ausbeute durch Western Blot mit einem anderen Anti-SNX4-Antikörper.
• Für ELISA-Anwendungen: Testen Sie eine Reihe von Beschichtungsantigenkonzentrationen und Antikörperverdünnungen unter Verwendung von rekombinantem SNX4-Protein oder -Peptid. Stellen Sie sicher, dass das Epitop im Beschichtungsformat zugänglich ist.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem SNX4; führen Sie eine anfängliche Validierung sowohl in humanen als auch in murinen Modellsystemen durch, um die spezies-spezifische Leistung zu bestätigen.
• Da SNX4 in dynamischen Membrantransportwegen funktioniert, können die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für die Immunfluoreszenz eine Optimierung erfordern, obwohl diese Anwendung für dieses Produkt nicht spezifiziert ist.

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