Smac/Diablo Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NR28

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Smac/Diablo

• Das DIABLO (SMAC)-Gen codiert ein mitochondriales Protein, das die Apoptose durch Aktivierung von Caspasen im Cytochrom-c/Apaf-1/Caspase-9-Weg fördert. Es wirkt gegen Inhibitoren von Apoptoseproteinen (IAPs), einschließlich BIRC6/BRUCE, Caspase-9 und XIAP/BIRC4. Verwandte Referenzen: PMID:15200957 PMID:36758104 PMID:36758105
• Smac/Diablo schwächt die Stabilität und apoptosehemmende Aktivität von XIAP/BIRC4 ab, indem es seine Ubiquitinierung und proteasomale Degradation fördert, und stört die XIAP/Caspase-9-Wechselwirkung, um die Aktivierung von Caspase-3 zu erleichtern.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen; Isoform 3 ist ubiquitär exprimiert und möglicherweise defekt in der XIAP-Herabregulierung.
• Subzellulär lokalisiert sich Smac/Diablo im Mitochondrium und wird bei apopototischen Stimuli ins Zytosol freigesetzt.
• Das Protein ist ubiquitär exprimiert mit den höchsten Gehalten im Hoden; auch hohe Gehalte in Herz, Leber, Niere, Milz, Prostata und Ovar; niedrig in Gehirn, Lunge, Thymus und peripheren Blutleukozyten.
• Schlüsselwörter: 3D-Struktur, Alternatives Spleißen, Apoptose, Zytoplasma, Taubheit, Direkte Proteinsequenzierung, Krankheitsvariante, Mitochondrium, Nicht-syndromische Taubheit, Ubl-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das rekombinante Immunogen (AS 56-239) entspricht der reifen prozessierten Region, die nach der mitochondrialen Spaltung erwartet wird; der Antikörper kann sowohl die volllängige (27 kDa) als auch prozessierte Formen (21/22 kDa) nachweisen.
• Für Western Blot sollten Sie geeignete Positivkontrolllysate aus menschlichen, Maus- oder Rattengeweben auftragen und reduzierende Bedingungen optimieren, um verschiedene Isoformen aufzutrennen.
• Bei IHC-P und IF/ICC sollten Antigenretrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0) und Permeabilisierung optimiert werden; zytoplasmatische/mitochondriale Färbemuster erfordern möglicherweise eine sorgfältige Validierung.
• ELISA-Anwendungen erfordern eine individuelle Titration von Capture- und Detektionsreagenzien; der Antikörper kann nach Funktionsprüfung als Teil eines passenden Paares evaluiert werden.

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