SARS-CoV-2 ORF3A Kaninchen-pAk - P0DTC3

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des SARS-CoV-2 ORF3A-Proteins

• Das ORF3a-Protein ist ein accessoires Protein von SARS-CoV-2, auch bekannt als Protein 3a, Protein U274 oder Protein X1.
• Es spielt eine Schlüsselrolle beim Virusaustritt, indem es den lysosomalen Transport von Virionen erleichtert (PubMed:33157038, PubMed:33422265). Verwandte Referenzen: PMID:33157038 PMID:33422265
• ORF3a bildet homotetramere Ionenkanäle (Viroporine) in endosomalen und lysosomalen Membranen, was möglicherweise eine Entsäuerung der Lysosomen induziert, um eine sichere Virusfreisetzung zu fördern (PubMed:33157038, PubMed:33422265, PubMed:34158638). Verwandte Referenzen: PMID:33157038 PMID:33422265 PMID:34158638
• Das Protein stört die Autophagie des Wirts durch Bindung an VPS39 an späten Endosomen, was die Fusion von Autophagosomen mit Lysosomen und die Bildung von Autolysosomen blockiert (PubMed:33422265). Verwandte Referenzen: PMID:33422265
• ORF3a induziert eine RETREG1/FAM134B-abhängige Reticulophagie durch Interaktion mit HMGB1, verstärkt die HMGB1-BECN1-Assoziation und verursacht ER-Stress und pro-inflammatorische Antworten (PubMed:35239449). Verwandte Referenzen: PMID:35239449
• Subzellulär lokalisiert sich ORF3a im Virion, in der Wirtszellmembran, der Membran des endoplasmatischen Retikulums, in sekretierten Formen, im Zytoplasma, in Endosomen und Lysosomen.
• Wichtige biologische Schlüsselwörter umfassen Glykoprotein, Wirts-Virus-Interaktion, Ionenkanal, Ionentransport, Aktivierung der Wirtsautophagie und Viroporin-Aktivität.
• Das Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von ~31,1 kDa (UniProt), was mit den beobachteten 31 kDa übereinstimmt, die für diesen Antikörper erwartet werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 100-200 des ORF3a-Proteins abdeckt; Antikörper-Bindeepitope können in diesem Bereich konzentriert sein, was bei der Planung von Experimenten oder der Interpretation von Ergebnissen berücksichtigt werden sollte.
• Für Western Blotting liegt die erwartete Bande für ORF3a bei etwa 31 kDa; validieren Sie die Spezifität unter Verwendung von Lysaten aus SARS-CoV-2-infizierten Zellen oder ORF3a-überexprimierenden Systemen.
• Bestätigen Sie bei ELISA-Anwendungen die optimalen Beschichtungsbedingungen und Antikörperverdünnungen unter Verwendung von rekombinantem ORF3a-Protein oder definierten positiven Kontrollen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz variieren; es wird empfohlen, jede neue Charge vor der großflächigen Verwendung in der vorgesehenen Anwendung zu qualifizieren.
• Der Antikörper wird auf nasseis geliefert; aliquotieren Sie ihn nach Erhalt und lagern Sie ihn bei -20°C (oder wie vom Hersteller empfohlen), um die Stabilität zu erhalten.

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