SARS-CoV-2 NSP6 Kaninchen pAb für WB und ELISA - P0DTD1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: SARS-CoV-2 NSP6 Funktion und Lokalisierung

• NSP6 ist ein Spaltprodukt des Replikase-Polyproteins 1ab (ORF1ab), das von SARS-CoV-2 kodiert wird, freigesetzt durch die virale Hauptprotease.
• Spielt eine entscheidende Rolle bei der Bildung und Aufrechterhaltung von Doppelmembranvesikeln (DMVs), die virale Replikationsorganellen sind. NSP6 verbindet endoplasmatische Retikulum-Membranen und bindet an Lipidtröpfchen, was die DMV-Biogenese erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:35551511
• Interagiert mit dem Wirtsprotein TBK1, ohne dessen Phosphorylierung zu beeinflussen, was zu einer verringerten IRF3-Phosphorylierung und einer Hemmung der Typ-I-Interferon-Produktion führt und so zur Umgehung der angeborenen Immunität beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:32979938
• Subzelluläre Lokalisation: Wirtsendoplasmatische Retikulum-Membran, DMVs und perinukleäre Region, konsistent mit ihrer Rolle bei der Membranumgestaltung.
• Voraussichtlich enthält es mehrere Transmembran-Helices, die die Assoziation mit der ER-Membran und Membranverbindungsfunktionen ermöglichen.
• Beteiligt an der viralen Immunabwehr und Unterdrückung der angeborenen Immunantwort des Wirts; identifiziert als ein Schlüsselfaktor bei der SARS-CoV-2-Replikation und Pathogenität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 236-290 von NSP6 (YP_009725302.1), einer Region, die unter SARS-CoV-2-Isolaten konserviert ist. Ziehen Sie die Verwendung infizierter Zelllysate oder transfizierter Zellen, die NSP6 exprimieren, zur Validierung in Betracht.
• Für Western Blot beachten Sie, dass der Antikörper sowohl das vollständige Replikase-Polyprotein (~794 kDa) als auch das gespaltene NSP6-Produkt detektieren kann. Validieren Sie die beobachteten Bandengrößen in Ihrem experimentellen System und schließen Sie geeignete Kontrollen ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA können gereinigtes rekombinantes NSP6-Protein oder virale Lysate als Beschichtungsantigene verwendet werden. Optimieren Sie die Antikörper- und Antigenkonzentrationen für das beste Signal-Rausch-Verhältnis.
• Titrieren Sie den Antikörper stets für jede Anwendung und schließen Sie positive und negative Kontrollen ein, um zuverlässige Ergebnisse zu gewährleisten.

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