SARS-CoV-2 NSP10 Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IP, ELISA - P0DTD1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von NSP10

• NSP10 ist ein nicht-strukturelles Protein, das von der Replikasegen (rep) von SARS-CoV-2 als Teil des ORF1ab-Polyproteins kodiert wird (Replikase-Polyprotein 1ab, P0DTD1). Es wird durch proteolytische Spaltung des Polyproteins freigesetzt.
• NSP10 spielt eine zentrale Rolle bei der viralen Transkription, indem es sowohl die 3'-5'-Exoribonuklease-Aktivität (Korrekturlesen) von nsp14 als auch die 2'-O-Methyltransferase-Aktivität von nsp16 stimuliert und damit die korrekte Methylierung der viralen mRNA-Kappe gewährleistet.
  Verwandte Referenzen: PMID:35944563
• NSP10 lokalisiert überwiegend im Zytoplasma und perinukleären Bereich des Wirts, wo es mit anderen nicht-strukturellen Proteinen interagiert, um den Replikations-Transkriptionskomplex (RTC) zu bilden.
• Als kritischer Kofaktor ist NSP10 für die virale RNA-Kappung essenziell, die dem Virus hilft, angeborene Immunsensoren des Wirts wie IFIT1 und IFIT3 zu umgehen.
• Das Protein ist unter Coronaviren hochkonserviert, was es zu einem potenziellen Ziel für antivirale Therapeutika und einem relevanten Antigen für die Antikörperentwicklung macht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 1–139 von SARS-CoV-2 NSP10 (YP_009725306.1) abdeckt. Von dieser Volllängen-Konstruktion wird erwartet, dass sie Antikörper erzeugt, die multiple Epitope erkennen und einen robusten Nachweis in Assays ermöglichen.
• Polyclonale Antikörper können eine geringe Chargenvariabilität aufweisen; es wird empfohlen, den Antikörper in dem spezifischen experimentellen System zu titrieren und zu validieren (z. B. infizierte Zelllysate für WB, IP oder ELISA).
• Für den Western Blot verwenden Sie geeignete Positivkontrollen wie SARS-CoV-2-infizierte Zelllysate oder überexprimiertes NSP10. Beachten Sie, dass NSP10 bei ~14 kDa wandert, während die angegebene Masse von 794 kDa das Volllängen-Replikase-Polyprotein widerspiegelt.
• Bei der Immunpräzipitation kann der Antikörper interagierende Partner wie nsp14 und nsp16 koimmunpräzipitieren; validieren Sie die Co-IP-Bedingungen sorgfältig.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem NSP10-Protein als Standard, um die Sensitivität und Spezifität des Antikörpers vor Tests mit klinischen Proben zu bewerten.

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