ROCK2 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - O75116

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ROCK2-Funktion und Lokalisierung

• ROCK2 (Rho-assoziierte Proteinkinase 2, auch bekannt als ROCK-II oder p164 ROCK-2) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die durch das ROCK2-Gen kodiert wird.
• Sie ist ein Schlüsselregulator des Aktinzytoskeletts und der Zellpolarität, beteiligt an der glatten Muskelkontraktion, der Bildung von Stressfasern und Fokaladhäsionen, der Neuritenretraktion, der Zelladhäsion und der Motilität.
• ROCK2 phosphoryliert eine Vielzahl von Substraten, darunter ADD1, BRCA2, CNN1, EZR, DPYSL2, EP300, MSN, MYL9/MLC2, NPM1, RDX, PPP1R12A, VIM, SORL1 und IRF4, und vermittelt so vielfältige zelluläre Prozesse.
• Das Protein wirkt als Negativregulator der VEGF-induzierten angiogenen Endothelzellaktivierung und reguliert MAPK1/3 und p90RSK während der myogenen Differenzierung positiv.
• Es spielt eine Rolle bei der Zentrosomen-Duplikation, der Hemmung der terminalen Differenzierung von Keratinozyten und könnte über die Aktomyosin-Organisation den Verschluss der Augenlider und der ventralen Bauchwand regulieren.
• Im Hippocampus ist ROCK2 entscheidend für die Regulation von Spines und synaptischen Eigenschaften und trägt auch zum zirkadianen Rhythmus der myofilamentären Ca²⁺-Sensitivität und vaskulären Kontraktilität der Aorta bei.
• Subzellulär lokalisiert ROCK2 im Zytoplasma, an der Zellmembran, im Zellkern, im Zytoskelett, im Mikrotubuli-Organisationszentrum und im Zentrosom.
• Das Protein enthält Coiled-Coil- und Zinkfinger-Domänen, sein Molekulargewicht beträgt etwa 160,9 kDa; es wird im Gehirn exprimiert und ist als Phosphoprotein klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting sollte die Verwendung eines SDS-PAGE-Gels mit niedrigem Prozentsatz (z.B. 6-8%) in Betracht gezogen werden, um das große ~161 kDa ROCK2-Protein effektiv aufzutrennen, und eine ausreichende Transferzeit auf Hochmolekulargewichts-Membranen sichergestellt werden.
• Bei der Immunhistochemie (Paraffin) müssen die Antigen-Retrieval-Bedingungen möglicherweise empirisch optimiert werden; testen Sie je nach Gewebetyp Zitronensäure- oder EDTA-basierte Methoden.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in Positivkontroll-Lysaten von humanen, Maus- oder Ratten-Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie ROCK2 exprimieren (z.B. HeLa, NIH/3T3 oder Hirngewebe), bevor Sie sie experimentell einsetzen.
• ELISA-Protokolle können von Peptid-Blockierungsexperimenten profitieren, um die Spezifität zu bestätigen; titrieren Sie den Antikörper für ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis.

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