RING1A Polyklonaler Antikörper (Kaninchen) für WB, IHC-P, ELISA - Q06587

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RING1A-Funktion und Lokalisierung

• RING1A, auch bekannt als RNF1 oder Polycomb-Komplexprotein RING1, ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die eine zentrale Rolle bei der Histonmodifikation und der epigenetischen Genregulation spielt.
• Sie stellt eine der E3-Ligasen dar, die die Monoubiquitinierung von Histon H2A an Lys-119 vermitteln, eine Modifikation, die als spezifisches Signal für die Transkriptionsrepression dient und für die X-Chromosom-Inaktivierung bei weiblichen Säugetieren essentiell ist.
• RING1A ist eine Kernkomponente des Polycomb-repressiven Komplexes 1 (PRC1), der den reprimierten Zustand wichtiger Entwicklungsregulatoren wie Hox-Gene durch Chromatin-Remodellierung und vererbbare Veränderungen der Genexpression aufrechterhält.
• Im Vergleich zu seinem Paralog RNF2/RING2 weist RING1A eine schwächere intrinsische E3-Ligase-Aktivität auf und wird hauptsächlich als Modulator oder Hilfsfaktor für die RNF2/RING2-vermittelte Histon-Ubiquitinierung angesehen.
• Durch alternatives Spleißen existieren mehrere Isoformen, und das Protein enthält eine RING-Typ-Zinkfinger-Domäne, die für seine Ubiquitin-Ligase-Funktion essentiell ist, sowie Motive für Metallbindung und Chromatinregulation.
• RING1A lokalisiert im Zellkern und ist in nukleären Speckles angereichert, was mit seiner Rolle in der Transkriptionsregulation und Chromatinorganisation übereinstimmt.
• Es unterliegt Phosphorylierung und wurde in Proteomik-Studien identifiziert, was auf eine dynamische posttranslationale Kontrolle seiner Aktivität innerhalb des Zellkerns hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 207-406, einer Region, die einen Teil der C-terminalen Domäne umfasst; daher erkennt der Antikörper möglicherweise die vollständige Länge von RING1A und potenziell einige Spleißvarianten, eine Validierung an relevanten Proben wird jedoch empfohlen.
• Für den Western Blot (WB) ist eine Bande bei etwa 42 kDa zu erwarten; ziehen Sie die Verwendung von Kernextrakten oder Gesamtzelllysaten aus humanen, murinen oder Ratten-Zelllinien als positive Kontrollen in Betracht und optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) validieren Sie den Antikörper an Paraffin-eingebetteten Gewebeschnitten, von denen bekannt ist, dass sie RING1A exprimieren, wenden Sie geeignete Antigen-Retrieval-Methoden an und testen Sie eine Reihe von Verdünnungen, um eine spezifische Kernfärbung zu erreichen.
• Bei ELISA ermöglicht die polyklonale Natur eine flexible Verwendung als Capture- oder Detektionsreagenz; die Paarung mit einem monoklonalen Antikörper kann jedoch die Spezifität in Sandwich-Formaten verbessern – die Chargenvariabilität sollte während der Assay-Entwicklung bewertet werden.

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