RCHY1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q96PM5

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RCHY1-Funktion und Lokalisierung

• RCHY1 ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die mehrere Ziele ubiquitiniert, darunter p53/TP53, TP73, HDAC1 und CDKN1B (PubMed:16914734, PubMed:17721809, PubMed:18006823). Verwandte Referenzen: PMID:16914734 PMID:17721809 PMID:18006823
• Es vermittelt die Ubiquitinierung und den Abbau von p53/TP53, mit einer Präferenz für tetrameres p53, was sich auf den Zellzyklusarrest und die Apoptose auswirkt (PubMed:19043414, PubMed:19483087). Verwandte Referenzen: PMID:19043414 PMID:19483087
• Monoubiquitiniert die Translesions-DNA-Polymerase POLH und reguliert so die DNA-Schadens-Toleranz (PubMed:21791603). Verwandte Referenzen: PMID:21791603
• Beteiligt sich an der ribosomenassoziierten Qualitätskontrolle durch Ubiquitinierung von blockierten neu entstehenden Ketten und erleichtert deren Abbau (PubMed:33909987). Verwandte Referenzen: PMID:33909987
• Ein alternatives Spleiß-Isoform fehlt die E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Aktivität.
• Lokalisiert im Zellkern (einschließlich Kernflecken) und im Zytoplasma.
• Posttranslational durch Phosphorylierung modifiziert.
• Enthält C3HC4-Typ RING-Finger- und CHY-Zinkfinger-Domänen, die Zink binden und für die katalytische Funktion essentiell sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 160-261 von humanem RCHY1, einer Region, die unter denaturierenden (WB) und nativen (ELISA) Bedingungen zugängliche Epitope bieten kann.
• Für die WB-Analyse: Beladen Sie Ganzzelllysate von humanen Zelllinien und erwarten Sie ein Band nahe 30 kDa; validieren Sie mit einer bekannten Positivkontrolle und einer geeigneten Negativkontrolle (z.B. RCHY1-Knockout-Zellen).
• Für ELISA: Beschichten Sie rekombinantes RCHY1-Protein als Standard und bestätigen Sie die Spezifität durch Kompetition oder durch Testen des Antikörpers an zielreduzierten Proben.
• Da RCHY1 ein Phosphoprotein ist, sollten Sie Phosphatase-Behandlungsexperimente in Betracht ziehen, wenn Bandenverschiebungen beobachtet werden.
• Titrieren Sie den Antikörper immer von einer empfohlenen Startkonzentration aus, um die optimale Arbeitsverdünnung für jeden Assay zu bestimmen.

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