RBX1 Kaninchen pAb für WB und ELISA - P62877

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RBX1-Funktion und Lokalisierung

• RBX1 (auch bekannt als ROC1, RNF75) ist eine Kernkomponente mehrerer Cullin-RING-E3-Ubiquitin-Ligase (CRL)-Komplexe, die Proteine für Ubiquitinierung und proteasomalen Abbau markieren und so den Zellzyklusfortschritt, die Signaltransduktion und die Transkription regulieren.
  Verwandte Referenzen: PMID:10230407, PMID:10579999, PMID:11961546
• Zusammen mit ARIH1 vermitteln CRL-Komplexe eine sequenzielle Ubiquitinierung, bei der ARIH1 das erste Ubiquitin an Substrate anfügt.
  Verwandte Referenzen: PMID:27565346
• Als Teil des CSA-Komplexes ubiquitiniert RBX1 die RNA-Polymerase II (POLR2A) an Lys-1268, ein entscheidender Schritt in der transkriptionsgekoppelten Nukleotidexzisionsreparatur (TC-NER).
  Verwandte Referenzen: PMID:32355176, PMID:34526721
• RBX1 ist eine Kernkomponente des Cul7-RING(FBXW8)-Komplexes, der spezifische Proteine zum Abbau markiert.
  Verwandte Referenzen: PMID:35982156
• Es bildet auch einen Cul9-RING-Ligase-Komplex, der p53/TP53 mono-ubiquitiniert.
  Verwandte Referenzen: PMID:38605244
• RBX1 rekrutiert das E2-Enzym CDC34 zum CRL-Komplex und kann dessen Autoubiquitinierung stimulieren; es fördert auch die Neddylierung von Cullinen über UBE2M.
• Beteiligt an der Ubiquitinierung von KEAP1, ENC1 und KLHL41 und fördert zusammen mit ATF2 und CUL3 den Abbau von KAT5, wodurch die ATM-Aktivierung moduliert wird.
• Das Protein ist sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern lokalisiert, wird weitgehend exprimiert und enthält eine Zinkfinger-Domäne, die für seine E3-Ligase-Aktivität essentiell ist; es unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1-100 des humanen RBX1 (NP_055063.1) entspricht. Für WB sollten Sie Ganzzelllysate von humanen, murinen oder Rattens-Zelllinien in Betracht ziehen; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt ~12 kDa. Verwenden Sie geeignete Blockierungs- und Detektionsbedingungen.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Nachweis von RBX1 in Serum- oder gereinigten Proteinassays verwendet werden; validieren Sie mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen.
• Angesichts der zentralen Rolle von RBX1 bei der Ubiquitinierung sollten Sie Proteasom-Inhibitoren (z.B. MG132) in Betracht ziehen, um ubiquitinierte Substrate in Ihrem experimentellen Aufbau zu stabilisieren.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung für jede Anwendung und jeden Probentyp; für die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte überprüfen Sie die spezies-spezifische Sequenzhomologie in der Immunogenregion.

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