Ratten-Anti-Maus CD3 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie - P04235 / P22646

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD3 (Delta- und Epsilon-Ketten) Funktion und Lokalisierung

• CD3 delta (Gen Cd3d) und epsilon (Cd3e) sind essentielle Bestandteile des T-Zell-Rezeptor (TCR)-CD3-Komplexes auf der Oberfläche von T-Lymphozyten und spielen eine zentrale Rolle in der adaptiven Immunität.
• Der CD3-Komplex (Delta-, Epsilon-, Gamma- und CD247/Zeta-Ketten) leitet Aktivierungssignale nach TCR-Bindung durch antigenpräsentierende Zellen weiter, über Phosphorylierung von immunorezeptor-tyrosinbasierten Aktivierungsmotiven (ITAMs) in ihren cytoplasmatischen Domänen.
• CD3D ist entscheidend für die Thymozytendifferenzierung und die korrekte Oberflächenexpression des TCR-CD3-Komplexes; eine Störung beeinträchtigt die T-Zell-Entwicklung. Verwandte Referenzen: PMID:10935641
• CD3 delta interagiert mit Korezeptoren CD4 und CD8, verbindet funktionell die TCR-Erkennung mit der Korezeptor-Signalgebung, die für die Aktivierung und positive Selektion von CD4+ oder CD8+ T-Zellen erforderlich ist.
• Sowohl CD3-delta- als auch -epsilon-Ketten sind Typ-I-Transmembranglykoproteine, die in der Plasmamembran lokalisiert sind.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbindungsbildung, Glykosylierung und ITAM-Phosphorylierung durch Src-Familien-Kinasen LCK und FYN.
• Zusammen haben die CD3-delta- und -epsilon-Ketten Molekulargewichte von etwa 19 kDa bzw. 21 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das -fluoreszierende Konjugat ermöglicht die direkte Detektion in der Durchflusszytometrie (FC) ohne die Notwendigkeit sekundärer Färbereagenzien.
• Um unspezifische Bindung zu reduzieren, erwägen Sie eine Vorinkubation der Zellen mit einem geeigneten Fc-Rezeptor-Blockierreagenz und verwenden Sie eine passende Ratten-IgG-Isotypenkontrolle.
• Optimieren Sie die Antikörperkonzentration durch Titration über einen Bereich (z.B. 0,1–5 µg/mL) im relevanten Zellsystem, um das beste Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen.
• Bereiten Sie Einzelzellsuspensionen vor und bewerten Sie die Lebensfähigkeit vor der Färbung, um robuste und reproduzierbare Ergebnisse zu gewährleisten.
• Der Antikörper wird für die Verwendung mit Mausproben empfohlen; validieren Sie die Assay-Bedingungen für Ihren spezifischen experimentellen Aufbau.

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