Kaninchen-anti-ZNF217 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O75362

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ZNF217

• Proteinidentität: Das Zinkfinger-Protein 217 (ZNF217), auch bekannt als ZABC1, ist ein Mitglied der Zinkfinger-Proteinfamilie. Es enthält mehrere C2H2-Typ-Zinkfinger-Domänen, die die DNA-Bindung und Transkriptionsregulation vermitteln.
• Transkriptionsrepressor: ZNF217 bindet an die Promotoren von Zielgenen und fungiert als Transkriptionsrepressor, der die Genexpression moduliert, um die Zellproliferation zu fördern und die Apoptose zu hemmen.
• Zellproliferation und Überleben: Das Protein spielt eine Rolle bei der Förderung der Zellproliferation und wirkt dem Zelltod entgegen. Es verstärkt die Phosphorylierung von AKT1 an Ser-473 und aktiviert den PI3K/AKT-Signalweg.
• Subzelluläre Lokalisation: ZNF217 ist im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle als Transkriptionsfaktor übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen: Laut UniProt-Schlüsselwörtern unterliegt ZNF217 der Phosphorylierung und der Bildung von Isopeptidbindungen (Ubiquitinierung), was auf eine Regulation durch diese Modifikationen hindeutet.
• Strukturelle Merkmale: Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 115 kDa und gehört zur Krueppel-C2H2-Typ-Zinkfinger-Proteinfamilie. Es enthält mehrere Zinkfinger-Wiederholungen, die seine DNA-Bindungsstruktur stabilisieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Immunogen-Design: Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Protein erzeugt, das die Aminosäuren 1-190 des humanen ZNF217 (N-terminale Region) abdeckt. Diese Region kann Epitope enthalten, die exponiert und speziesübergreifend konserviert sind, was die beobachtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte erklärt.
• Western Blotting (WB): Für WB die Proteine auf einem SDS-PAGE-Gel mit geeignetem Prozentsatz (z. B. 8–10 %) trennen, um die ca. 115 kDa schwere ZNF217-Bande aufzulösen. Die Verdünnung des Primärantikörpers empirisch validieren; typische Bereiche für polyklonale Antikörper liegen bei 1:500–1:2000.
• Immunfluoreszenz/Immuncytochemie (IF/ICC): Da ZNF217 nukleär ist, sollte während der Fixierung ein Permeabilisierungsschritt (z. B. 0,1 % Triton X-100) durchgeführt werden, um den Zugang des Antikörpers zu ermöglichen. Eine nukleäre Gegenfärbung (z. B. DAPI) einschließen, um die Lokalisation zu bestätigen.
• ELISA: Das rekombinante Immunogen kann als Positivkontrolle im ELISA dienen. Beschichtungskonzentration und Antikörperverdünnung basierend auf vorläufigen Schachbrett-Titrationen optimieren.
• Kreuzreaktivität: Eine Kreuzreaktivität mit ZNF217 von Maus und Ratte wurde berichtet. Durch Sequenzabgleich der N-terminalen Region überprüfen, um die Epitop-Konservierung zu bewerten. In relevanten Zelllinien oder Geweben dieser Spezies validieren.

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