Kaninchen-anti-Ratte-IFN-gamma-monoklonaler Antikörper () für die Durchflusszytometrie – P01581

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von IFN-gamma

• IFN-gamma ist ein Interferon des Typs II und ein für die angeborene und adaptive Immunität gegen virale, bakterielle und protozoale Infektionen entscheidendes Zytokin.
• Es wird überwiegend von aktivierten T-Lymphozyten und natürlichen Killerzellen (NK-Zellen) produziert.
• Die Signalübertragung über den IFN-gamma-Rezeptor (IFNGR1/IFNGR2) aktiviert den JAK-STAT-Signalweg und führt zur Transkription von Interferon-stimulierten Genen.
• Es spielt eine zentrale Rolle bei der Antigenpräsentation, indem es Untereinheiten des Immunoproteasoms induziert und die Expression von MHC-Klasse-I- und -II-Molekülen auf der Zelloberfläche hochreguliert.
• Es ist an der Regulation der Ruhephase und Differenzierung hämatopoetischer Stammzellen unter homöostatischen Bedingungen beteiligt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung und die Bildung eines N-terminalen Pyroglutamats (Pyrrolidoncarbonsäure).
• Sekretiertes Protein, das hauptsächlich von aktivierten Immunzellen freigesetzt wird.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sollten die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte für den jeweiligen Zelltyp optimiert werden. Standardprotokolle mit Paraformaldehyd-Fixierung und saponinbasierter Permeabilisierung können geeignet sein.
• Beziehen Sie unstimulierte und stimulierte T-Zell-Kontrollen von Ratten ein, um die Spezifität des Antikörpers zu bestätigen. Die Stimulation von Ratten-Splenocyten mit PMA/Ionomycin ist eine gängige Positivkontrolle.
• Das ABflo®-647-Konjugat wird durch Laser mit 633–647 nm angeregt und emittiert im fernroten Kanal (z. B. APC-Kanal). Stellen Sie geeignete Kompensationseinstellungen sicher.
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 20–156 und entspricht dem reifen IFN-gamma-Protein, was darauf hindeutet, dass der Antikörper die natürliche sezernierte Form erkennt.
• Titrieren Sie die Antikörperkonzentration, um eine optimale Färbung bei minimalem Hintergrund zu erzielen.

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