Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen PERK für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – Q9NZJ5

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PERK

• Der eukaryotische Translationsinitiationsfaktor-2-alpha-Kinase 3 (EIF2AK3), allgemein bekannt als PERK (PRKR-ähnliche Kinase des endoplasmatischen Retikulums), wird auch als pankreatische eIF2-alpha-Kinase (HsPEK), Protein-Tyrosinkinase EIF2AK3, PEK und WRS bezeichnet.
• Fungiert als Kinase zur Wahrnehmung von metabolischem Stress und phosphoryliert als Reaktion auf Stress des endoplasmatischen Retikulums die Alpha-Untereinheit des eukaryotischen Translationsinitiationsfaktors 2 (EIF2S1/eIF-2-alpha). Dabei wirkt sie als zentraler Effektor der ungefalteten Proteinantwort (UPR). Verwandte Referenzen: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• Nach der Aktivierung schwächt die PERK-vermittelte Phosphorylierung von eIF-2-alpha die globale, von der Cap-Struktur abhängige Translation ab, während sie selektiv die Translation von ISR-spezifischen mRNAs wie ATF4 und QRICH1 fördert und dadurch eine zelluläre Neuprogrammierung ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• Phosphoryliert unter Stress zusätzlich NFE2L2/NRF2, wodurch dessen Freisetzung aus dem KEAP1-Komplex, die nukleäre Akkumulation und die Aktivierung von Genen der antioxidativen Antwort gefördert werden.
• Trägt zur mitochondrialen Regulation bei: Die PERK-abhängige UPR-Signalübertragung steigert die oxidative Phosphorylierung, indem sie die ATF4-vermittelte Expression von COX7A2L/SCAF1 und die Bildung von Superkomplexen der Atmungskette fördert; an Kontaktstellen zwischen Mitochondrien und endoplasmatischem Retikulum wird ihre Aktivität durch ATAD3A gehemmt, um die mitochondriale Funktion zu schützen. Verwandte Referenzen: PMID:31023583, PMID:39116259
• Ist entscheidend für den durch die UPR induzierten G1-Wachstumsarrest durch Verlust von Cyclin D1 (CCND1).
• Lokalisiert sich in der Membran des endoplasmatischen Retikulums und wird ubiquitär exprimiert, wobei besonders hohe Konzentrationen in sekretorischen Geweben vorliegen.
• Schlüsselwörter: ADP-Ribosylierung, ATP-Bindung, Stressantwort, Translationsregulation, Serin/Threonin-Proteinkinase, Tyrosin-Proteinkinase, ungefaltete Proteinantwort.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäurereste 867–1116) umfasst die Kinasedomäne; es wird erwartet, dass der Antikörper die C-terminale zytoplasmatische Region von PERK erkennt.
• Im Western Blot wird eine spezifische Bande bei etwa 125 kDa erwartet; validieren Sie dies mit geeigneten positiven und negativen Zell- oder Gewebelysaten.
• Bei IHC-P und IF/ICC sollte die Färbung die Lokalisation im endoplasmatischen Retikulum widerspiegeln; erwägen Sie den Einsatz von Induktoren für ER-Stress (z. B. Tunicamycin, Thapsigargin) als experimentelle Kontrollen.
• Beim ELISA kann die polyklonale Beschaffenheit eine breite Epitopabdeckung ermöglichen; titrieren Sie den Antikörper und bestätigen Sie die Spezifität mit rekombinantem PERK-Protein oder endogenem PERK aus gestressten Proben.

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