Kaninchen anti-Maus/Ratte CD54 monoklonaler Antikörper für FC - P13597

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: CD54-Funktion und -Lokalisierung

• CD54 (ICAM-1, Ly-47) ist ein Zelladhäsionsmolekül, das als Rezeptor für die Integrine LFA-1 (ITGAL:ITGB2) und MAC-1 (ITGAM:ITGB2) dient und die Leukozytenadhäsion sowie die transendotheliale Migration vermittelt.
• CD54 ist ein Typ-I-Membranprotein mit einer einzigen Transmembrandomäne, das an der Zelloberfläche lokalisiert ist und eine extrazelluläre Region mit immunglobulinähnlichen Domänen aufweist.
• Es wird auf Lymphozyten, Makrophagen und Endothelzellen in geringen Mengen exprimiert, wird aber nach Stimulation in verschiedenen Zelltypen, einschließlich Fibroblasten und Epithelzellen, stark induziert.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen; das Protein unterliegt der N-Glykosylierung und bildet Disulfidbrücken, was zu seiner Struktur und Funktion beiträgt.
• Die Wechselwirkung von CD54 mit LFA-1 kalibriert die Stärke der T-Zell-Tötung, während die Bindung an MAC-1 auf Neutrophilen die Adhäsion an stimuliertes Endothel fördert.
• In Epithelzellen fördert CD54 die Zellaggregation durch Wechselwirkung mit MUC1.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen die Ubiquitin-Konjugation, und das Protein wird zur Immunglobulin-Superfamilie der Zelladhäsionsmoleküle gezählt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wird gegen ein rekombinantes Fusionsprotein erzeugt, das die Aminosäuren 28-485 von Maus-CD54 (NP_034623.1) abdeckt und die extrazelluläre Domäne umfasst, was für die Erkennung des nativen Zelloberflächenproteins in der Durchflusszytometrie geeignet ist.
• Für FC-Anwendungen titrieren Sie den Antikörper im relevanten Probensystem, um die optimale Konzentration zu ermitteln.
• Erwägen Sie die Verwendung geeigneter Isotyp-Kontrollen und schließen Sie Marker für den Ausschluss toter Zellen ein, um Leukozytenpopulationen genau zu analysieren.
• Der konjugierte Fluorophor ist mit gängigen Durchflusszytometern kompatibel, die mit einem blauen Laser (488 nm) ausgestattet sind; sorgen Sie bei der Multiplexierung mit anderen Fluorophoren für eine geeignete Kompensation.
• Der Antikörper kreuzreagiert sowohl mit Maus als auch mit Ratte; validieren Sie die Reaktivität in der Zielspezies und dem Gewebetyp unter experimentellen Bedingungen.

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