Kaninchen anti-Maus S100A9 monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie (intrazellulär) - P31725

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: S100A9-Funktion und -Lokalisierung

• S100A9 (auch bekannt als Calgranulin-B, MRP14, p14) ist ein Mitglied der S100-Familie von Calcium-bindenden Proteinen mit einem Molekulargewicht von etwa 13 kDa.
• S100A9 ist ein Calcium- und Zink-bindendes Protein, das eine bedeutende Rolle bei der Regulation von Entzündungsprozessen und der Immunantwort spielt. Verwandte Referenzen: PMID:15331440 PMID:17767165 PMID:18403730
• Intrazellulär erleichtert es als Teil des Calprotectin-Komplexes mit S100A8 den Transport und Stoffwechsel von Arachidonsäure in Leukozyten, moduliert das tubulinabhängige Zytoskelett während der Migration von Phagozyten und aktiviert die neutrophile NADPH-Oxidase. Verwandte Referenzen: PMID:15331440
• Extrazellulär entfaltet S100A9 proinflammatorische, antimikrobielle, oxidantienabbauende und apoptoseinduzierende Aktivitäten. Verwandte Referenzen: PMID:21382888
• Es wirkt als Alarmin, bindet an TLR4 und AGER, was die MAP-Kinase- und NF-kappa-B-Signalwege aktiviert und die proinflammatorische Kaskade verstärkt. Verwandte Referenzen: PMID:17767165 PMID:18403730 PMID:19402754
• S100A9 ist im Zytoplasma lokalisiert, mit dem Zytoskelett assoziiert und kann sezerniert werden; es lokalisiert auch an der Zellmembran.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Methylierung und Phosphorylierung, die seine vielfältigen Funktionen regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie Zellen gemäß Standardprotokollen fixieren und permeabilisieren (z. B. mit einem Fixierungs-/Permeabilisierungskit), um dem Antikörper Zugang zum zytoplasmatischen S100A9 zu ermöglichen.
• Titrieren Sie den -konjugierten Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre experimentellen Bedingungen zu bestimmen.
• Schließen Sie geeignete positive Kontrollen (z. B. Maus-Neutrophile oder Monozyten, die hohe S100A9-Level exprimieren) und negative Kontrollen (Isotypenkontrolle oder unstimulierte Zellen) in Ihren Assay ein.
• Bedenken Sie, dass S100A9 Komplexe mit S100A8 bilden kann; diese Interaktion kann die Epitopzugänglichkeit beeinflussen, validieren Sie daher, ob der Antikörper die monomere oder komplexierte Form in Ihrem Assay erkennt.
• Dieser Antikörper wurde gegen die Vollsequenz von Maus-S100a9 (Aminosäuren 1-113) hergestellt, daher kann er mit anderen Spezies kreuzreagieren, wenn die Sequenzen hochkonserviert sind, aber der Hersteller validiert nur die Reaktivität in der Maus. Testen Sie bei Bedarf in anderen Spezies.

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