Kaninchen-anti-Maus Ki67 monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie (intrazellulär) - E9PVX6

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Ki67

• Proliferationsmarkerprotein Ki‑67 (Antigen KI‑67-Homolog), kodiert durch das Mki67-Gen, bindet an die Oberfläche von mitotischen Chromosomen und spielt eine entscheidende Rolle bei der Chromosomendispersion und -aggregation während der Mitose.
• Es ist erforderlich, um einzelne mitotische Chromosomen im Zytoplasma nach der Auflösung der Kernhülle verteilt zu halten: Es wirkt als Chromosomen-Repellent während der frühen Mitose und als Chromosomen-Attraktant während der späten Mitose. Zugehörige Referenzen: PMID:27362226
• Während der frühen Mitose bildet Ki‑67 ausgedehnte bürstenartige Strukturen, die einen großen Teil der Chromosomenoberfläche bedecken; diese Bürste erzeugt eine sterische und elektrostatische Ladungsbarriere und wirkt als Tensid, das verhindert, dass Chromosomen zu einem einzelnen Chromatin-Mass kollabieren. Zugehörige Referenzen: PMID:27362226
• In der Anaphase kollabiert die Ki‑67-Bürste; Dephosphorylierung während des Mitoseaustritts legt eine konservierte basische Region frei, die eine RNA-abhängige flüssig-flüssig Phasentrennung induziert und Ki‑67 zu einem Chromosomen-Attraktant umwandelt, der die Chromosomenaggregation fördert.
• Es trägt nicht zur internen Struktur mitotischer Chromosomen bei. Zugehörige Referenzen: PMID:26949251
• Subzellulär lokalisiert es sich auf Chromosomen, im Zellkern und Nukleolus; es ist hauptsächlich in proliferierenden Zellen vorhanden. Es enthält Domänen für die DNA-Bindung (bevorzugt supercoilierte und AT-reiche DNA) und unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen erstreckt sich über den C-terminalen Bereich (Aa 1816‑2163), der die Ki67-Wiederholungsdomänen enthält, die für die Chromosomenassoziation wichtig sind; dieser Bereich ist relativ konserviert, was möglicherweise eine Kreuzreaktivität mit verwandten Spezies unterstützt.
• Optimiert für intrazelluläre Durchflusszytometrie; Stellen Sie sicher, dass geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle verwendet werden, damit der Antikörper Zugang zu nukleärem Ki67 hat. Fügen Sie geeignete Isotypkontrollen hinzu und validieren Sie in einer bekannten proliferierenden Maus-Zelllinie.
• Die große Proteinmasse (351 kDa) kann bei anderen Techniken wie dem Western Blot zu Herausforderungen führen; Wenn Sie andere Anwendungen prüfen, berücksichtigen Sie verlängerte Elektrophorese- und Transferzeiten und überprüfen Sie die Leistung immer empirisch.

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