Kaninchen anti-Maus IL1R1/CD121a monoklonaler Antikörper für Durchflusszytometrie - P13504

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: IL1R1/CD121a Funktion und Lokalisierung

• Interleukin-1-Rezeptor Typ 1 (IL1R1), auch bekannt als CD121a, IL-1R alpha, p80, wird bei Mäusen durch das Il1r1-Gen kodiert.
• Fungiert als Rezeptor für Interleukin-1 alpha (IL1A), Interleukin-1 beta (IL1B) und den IL-1-Rezeptorantagonisten (IL1RN) und bindet diese Liganden mit vergleichbarer Affinität.
• Nach Ligandenbindung assoziiert IL1R1 mit dem Korezeptor IL1RAP, um einen hochaffinen Signalkomplex zu bilden, was zur Aktivierung der NF-kappa-B- und MAPK-Signalwege führt.
• Die Signalübertragung umfasst die TIR-Domain-vermittelte Rekrutierung von Adapterproteinen wie TOLLIP, MYD88, IRAK1 oder IRAK2.
• Isoform 2 wird in Hirngeweben exprimiert und vermittelt zusammen mit IL1RAP-Isoform 3 die IL1B-induzierte neuronale Aktivität, einschließlich der Potenzierung des NMDA-Rezeptor-vermittelten Kalziumeinstroms durch Akt-Kinase-Aktivierung.
• IL1R1 ist ein Transmembran-Glykoprotein mit Disulfidbrücken und immunglobulinähnlichen Domänen und gehört zur Familie der Interleukin-1-Rezeptoren.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Glykosylierung; eine sezernierte Form wurde ebenfalls identifiziert.
• Spielt eine Rolle bei Entzündungsreaktionen und der Kostimulation von T-Helfer-1 (Th1)-Zellen bei der IFNG-Produktion.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 20–338) deckt die extrazelluläre Domäne von Maus IL1R1 ab, was es geeignet macht, die Oberflächenexpression mittels Durchflusszytometrie ohne Permeabilisierung zu detektieren.
• Das -Konjugat wird durch den 488-nm-Laser angeregt und emittiert im grünen Kanal (z. B. FITC/GFP); sorgen Sie für eine Kompensation, wenn es in Multicolor-Panels verwendet wird.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Konzentration für Ihren spezifischen Zelltyp und Ihre Färbebedingungen zu ermitteln; typische Startverdünnungen reichen von 1:50 bis 1:200.
• Verwenden Sie einen geeigneten Isotyp-Kontrollantikörper, der mit dem gleichen Fluorophor konjugiert ist, um unspezifische Bindungen zu bewerten.
• Maus-Fc-Rezeptoren können mit anti-CD16/CD32 (Fc-Block) blockiert werden, um den Hintergrund zu reduzieren, insbesondere bei Zellen mit hoher Fc-Rezeptor-Expression.
• Bereiten Sie Einzelzellsuspensionen vor und verwenden Sie einen Viabilitätsfarbstoff, um tote Zellen auszuschließen, die Antikörper unspezifisch binden können.
• Die Fixierung mit Paraformaldehyd kann das Epitop beeinflussen; validieren Sie die Fixierungsbedingungen, wenn eine Fixierung nach der Färbung erforderlich ist.

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