Kaninchen-anti-Maus-IL-17A-monoklonaler Antikörper für die Durchflusszytometrie – Q62386

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Interleukin-17A

• Interleukin-17A (IL-17A), auch als CTLA-8 bekannt, ist ein sezerniertes Effektorzytokin, das für die antimikrobielle Wirtsabwehr und die Aufrechterhaltung der Gewebeintegrität entscheidend ist. Verwandte Referenzen: PMID:18025225, PMID:19144317, PMID:26431948
• IL-17A signalisiert über das IL17RA-IL17RC-Heterodimer, rekrutiert den TRAF3IP2-Adapter und aktiviert TRAF6-abhängige NF-κB- und MAPK-Signalwege zur Induktion von Entzündungszytokinen, Chemokinen und Matrixmetalloproteinasen. Verwandte Referenzen: PMID:16200068, PMID:17911633, PMID:19144317
• Als charakteristisches Zytokin der T-Helfer-17-Zellen (Th17) fördert IL-17A durch die Induktion von CXCL1 und CXCL5 im Atemwegsepithel die Rekrutierung und Chemotaxis von Neutrophilen und unterstützt durch die Regulation der B-Zell-Antworten auf CXCL12 und CXCL13 die Bildung von Keimzentren. Verwandte Referenzen: PMID:18025225, PMID:27923703, PMID:18157131
• Neben Th17-Zellen wird IL-17A auch von Zellen der angeborenen Immunität produziert, darunter γδ-T-Zellen, invariante natürliche Killer-T-Zellen (iNKT-Zellen) und angeborene lymphoide Zellen der Gruppe 3 (ILC3s), wodurch eine frühe neutrophile Entzündung und die Beseitigung von Bakterien vermittelt werden. Verwandte Referenzen: PMID:17372004, PMID:20364087, PMID:28709803, PMID:17470641, PMID:23255360
• IL-17A spielt eine direkte Rolle bei der Aufrechterhaltung der Epithelbarriere, indem es nach einer akuten Verletzung die Bildung von Tight Junctions, beispielsweise die Lokalisation von Occludin (OCLN), reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:26431948
• In Synergie mit IL-17F induziert IL-17A die Produktion antimikrobieller β-Defensine (DEFB1, DEFB103A, DEFB104A) durch Schleimhautepithelzellen und begrenzt dadurch das Eindringen von Mikroorganismen. Verwandte Referenzen: PMID:19144317
• IL-17A trägt zur antiviralen Immunität bei, indem es die Zytotoxizität von T-Zellen gegen das West-Nil-Virus verstärkt und die Rekrutierung sowie Differenzierung von B-Zellen für eine effiziente Beseitigung des Influenza-A-Virus fördert. Verwandte Referenzen: PMID:27795421, PMID:21946434, PMID:26735852
• Auf molekularer Ebene ist IL-17A ein etwa 18 kDa großes, sezerniertes Glykoprotein mit einem Signalpeptid, Disulfidbrücken und Stellen für die N-glykosylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Dieser Antikörper ist bereits an konjugiert und ermöglicht den direkten Nachweis ohne Sekundärantikörper. Bei Handhabung und Lagerung muss er vor Licht geschützt werden.
• Für die intrazelluläre Durchflusszytometrie sind eine gründliche Fixierung und Permeabilisierung erforderlich. Erwägen Sie die Verwendung eines kommerziellen Kits für die intrazelluläre Färbung, das für Zytokine optimiert ist.
• Titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Verdünnung für Ihr spezifisches experimentelles System und Ihren Zelltyp zu bestimmen, da die Färbeeffizienz variieren kann.
• Beziehen Sie bei der Einrichtung von Multiparameter-Panels geeignete Kontrollen ein, beispielsweise unstimulierte Zellen, eine Isotypkontrolle und Kontrollen ohne das jeweilige Fluorophor (FMO-Kontrollen).
• Obwohl der Antikörper für die intrazelluläre Durchflusszytometrie (FC intra) validiert ist, wurde seine Leistung in anderen Anwendungen, beispielsweise Immunhistochemie oder Western Blot, nicht bestimmt und müsste im jeweiligen Probensystem validiert werden.
• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 26–158 und umfasst damit das reife sezernierte Protein. Daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich die native Konformation.

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